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标题:【讨论.精华帖.】细胞培养专区

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发表于 2012-9-19 16:12 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
你弄混了建系的概念。

一般来说，原代之后的细胞培养均称为细胞系，只是大多数细胞系在传代2-6代间都趋于死亡了，能稳定传代的细胞系不多，传下来的就是我们常见的“细胞系”了。我们常见的细胞系实质上只是细胞系的一小部分，只是能稳定传代的那部分细胞系。
因此，也存在代数的问题，要从原代之后开始算，一般能稳定传代的都是10代以后的细胞系。
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园丁##[使用道具]
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发表于 2012-9-19 16:12 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
你的231是用什么转染。脂质体还是电穿孔，
要求不一样的，其实什么都可以，试试，其实我的经验都是试出来的，做多了就知道了，其时，绝大多数试验的要求还是比较宽松的，不一定要按书本作。明白道理，你会自由很多。

祝你好运。
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yychen[使用道具]
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发表于 2012-9-19 16:12 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
我养的不是293细胞，我养的是MCF-7。因为我的细胞是找别人拿的，所以我不知道传了多少代，而实验要求细胞传代次数不能太多，而给我细胞的人也说细胞有些老化，但我拿回来后，长的很快，我已冻了两管，不知这样的细胞能用于实验吗？请指教。
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园丁##[使用道具]
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发表于 2012-9-19 16:13 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
MCF-7细胞很皮实的，没问题，长得飞快的，很耐老化。没问题，多加血清，有半个月就可以了。
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tuuu2[使用道具]
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发表于 2012-9-19 16:15 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

我从两个地方拿过2次HepG2细胞，细胞的性状截然不同，有点细胞退化太厉害了。深感细胞应该注意及时冻存保存。传代对细胞影响太大了。
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mamamiya[使用道具]
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发表于 2012-9-19 16:16 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
各位细胞培养的高手：
1.从外周血分离PBMC，通过黏附贴壁的方法，加入IL-4、GM-CSF诱导贴壁的单核细胞向DC转化，一般40ml外周血能够分离得到多少DC？
2.PBMC中诱导出的DC，CD1a阳性的细胞量有多高？
3.7天后镜下观察的细胞基本都悬浮生长，光镜下观察的细胞外形都是圆的，怎么不象一些文献中所说的有毛刺状突起。

谢谢。
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发表于 2012-9-19 16:16 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

个人体会，如果所培养的细胞培养时间过长，细胞老化，可以把细胞以极低密度传代，消化细胞成悬液后，只要一滴或几滴，传到别的培养瓶中，多放培养基，培养它十来天，长出来的细胞都是很好的集落状，长滿60%汇合后传代，就会发现，此时细胞不仅形态好，而且活力甚高。
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发表于 2012-9-19 16:17 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
可能是你们财大气粗，我们科室都是用国产的杭州四季青的血清也挺好的。
我们科室有养白血病细胞的，也有养骨髓细胞的（包括骨髓干细胞），还有做造血干祖细胞集落培养等。
对于293细胞我没养过，但欢迎大家一起交流所有细胞培养方面的知识。
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dotaaa[使用道具]
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发表于 2012-9-19 16:18 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
这大概就是所谓的黑胶虫，双抗、制霉菌素等均无效，只有抛弃。

有时可能是细胞碎片，如果想留下细胞的话，可以离心几次，或许能够解决问题。
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园丁##[使用道具]
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 小中大
楼上是毕隆转基因公司的吧。

已经不止一次发现你们公司的广告了。

这里是学术交流区域，

还是请兄台找合适的地方做生意吧。

你慢走，不送。

谢谢！···
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