细胞世界 » 讨论区 » 经验共享 » 【讨论.精华帖.】细胞培养专区

采购询价

点击提交代表您同意 《用户服务协议》 《隐私政策》

 1116  9/112 |‹‹‹78910111213141516›››|
 
需要登录并加入本群才可以回复和发新贴
打印 | 推荐 | 订阅 | 收藏

标题:【讨论.精华帖.】细胞培养专区

tieshazhang[使用道具]
三级
Rank: 3Rank: 3


UID 74105
精华 0
积分 338
帖子 436
信誉分 100
可用分 2916
专家分 0
阅读权限 255
注册 2011-10-5
状态 离线
81

发表于 2012-9-19 16:19 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
我培养的是HepG2 细胞,用的是DMEM低糖培养基。培养过程中出现一些透明的、颗粒状的东西,有的散在细胞之间,有的吸附在细胞表面.而且越来越多，但培养液不浑浊。刚开始时细胞生长不受影响，后来细胞就长不好了。我试着加两性霉素D，也除不掉。但我的培养液中有双抗，应该不是细菌污染啊...请问大家有没有相同的经历啊...都快急死了...
     兄弟们...帮忙啊...而且那东西比细胞小得多...越来越多之后细胞就很难看...有的细胞从瓶壁上脱落下来...
     就是不明白那是什么东西啊...有什么办法可以除掉啊...
顶部
tieshazhang[使用道具]
三级
Rank: 3Rank: 3


UID 74105
精华 0
积分 338
帖子 436
信誉分 100
可用分 2916
专家分 0
阅读权限 255
注册 2011-10-5
状态 离线
82

发表于 2012-9-19 16:20 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
...显微镜下观察,没有看到菌丝...只是单个的颗粒.....到底是什么啊....真是又烦又急.....
顶部
园丁##[使用道具]
超级版主
Rank: 8Rank: 8


UID 74049
精华 0
积分 1981
帖子 3179
信誉分 101
可用分 16786
专家分 10
阅读权限 150
注册 2011-10-4
状态 离线
83

发表于 2012-9-19 16:21 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

    这种东东我遇到过，它多发生于细胞很长时间不换液，长得很老状态不好的时候，其实质是什么我不清楚，可以肯定不是细菌真菌，支原体或黑胶虫。丫啶橙染色显明量均匀的绿色，表明其核酸丰富，但细胞质并不明显。通过多次换液，当细胞如果能转好的时候，这些东东会消失，给人感觉是这些东东天然存在，细胞长不好就会致病，就像机会感染一样。
   
  早年我还换液挽救，但很快就不干了，根本就得不偿失，不如重新复苏一只新的细胞。
顶部
jrwyyplt[使用道具]
三级
Rank: 3Rank: 3


UID 79380
精华 1
积分 406
帖子 488
信誉分 102
可用分 3193
专家分 10
阅读权限 255
注册 2011-12-10
状态 离线
84

发表于 2012-9-19 16:22 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

我觉得不能排除污染，你可以请细菌室的帮忙看看，染色后几分钟就可以知道。我的细胞曾经被空气中存在的极低毒性的细菌污染，表现和你描述的极象。且细胞可以长期换液不浑浊。
顶部
remenb[使用道具]
四级
Rank: 4


UID 75236
精华 0
积分 631
帖子 941
信誉分 100
可用分 5531
专家分 0
阅读权限 255
注册 2011-10-20
状态 离线
85

发表于 2012-9-19 16:24 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
有哪位同道培养过“原代”成骨细胞？能否介绍些您的经验？如取材、所用的培养基，最好给介绍些具体的成功步骤。
谢谢！！
顶部
owanaka[使用道具]
三级
Rank: 3Rank: 3


UID 76900
精华 0
积分 395
帖子 510
信誉分 100
可用分 3337
专家分 0
阅读权限 255
注册 2011-11-10
状态 离线
86

发表于 2012-9-19 16:24 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

Mini Plast公司的一次性培养皿哪家公司代理？
顶部
园丁##[使用道具]
超级版主
Rank: 8Rank: 8


UID 74049
精华 0
积分 1981
帖子 3179
信誉分 101
可用分 16786
专家分 10
阅读权限 150
注册 2011-10-4
状态 离线
87

发表于 2012-9-19 16:25 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

呵呵呵...谢谢各位的帮助,我已经找出原因了,是支原体感染....用一些点抗生素轻松搞定啦......对细胞无任何不良影响,而且据说目前尚无耐此种抗生素的支原体菌株....
顶部
铜雀[使用道具]
三级
Rank: 3Rank: 3


UID 76992
精华 0
积分 344
帖子 365
信誉分 101
可用分 2611
专家分 10
阅读权限 255
注册 2011-11-11
状态 离线
88

发表于 2012-9-19 16:27 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

是哪种抗生素呀？
红霉素类的吗？除了大环内酯类还有别的吗？
顶部
yueban-1147[使用道具]
四级
Rank: 4


UID 75776
精华 0
积分 692
帖子 1064
信誉分 100
可用分 6113
专家分 0
阅读权限 255
注册 2011-10-27
状态 离线
89

发表于 2012-9-19 16:30 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

不是啊...是泰乐菌素...兽用支原体病的药....但可用于细胞培养...无任何不良反应...Sigma有得卖....很便宜的120元/20ml(8mg/ml).....
使用时用50ug/ml Tylosin培养液培养6天或连续传两代即可清除支原体污染....

如果作为常用的抗生素的话, 建议用8ug/ml的浓度....
顶部
zsxan1990[使用道具]
三级
Rank: 3Rank: 3


UID 76272
精华 0
积分 442
帖子 604
信誉分 100
可用分 3776
专家分 0
阅读权限 255
注册 2011-11-3
状态 离线
90

发表于 2012-9-19 16:32 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

我想往细胞培养液里加入其他的一些诱导物质，不知有什么要注意的地方？望各位指点一下！
顶部
 1116  9/112 |‹‹‹78910111213141516›››|