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标题:【求助】二甲亚枫怎样消毒?

star#room[使用道具]
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买Sigma的,5ml/支,无需消毒,并且冻存的效果非常好,细胞复苏后生长旺盛。我以前用国产的,高压消毒处理后细胞难以复苏。
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yychen[使用道具]
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只能用尼龙滤膜或改性纤维素膜的滤器,康宁公司和密理博公司都有相应的型号,价格是14-16元/个。

可以一次过滤50ml,储存在无菌容器中备用,

另外,取用DMSO时,不可使用一次性注射器,因为其中的活塞是橡胶制成,可被DMSO溶胀。一定要使用玻璃注射器,或者使用移液器吸取。

另外,SIGMA公司和其他公司的细胞培养专用DMSO,是经过除菌的,可以直接使用。
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00无名指00[使用道具]
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同意楼上的观点,用sigma的dmso,不用高压或过滤的
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xingyi08[使用道具]
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哪里还需要消毒!
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看到许多朋友的贴子,我心里真的感觉很沉重。我不多说了,只把我过去发表在中国生物论坛的贴子转过来,希望对需要的朋友有些帮助。当然,许多人不需要看。

ylcui 发表于 2012-07-05.02:48:21 
DMSO的沸点很高,应该说摄氏121度不会沸腾。但是考虑到容器问题,和安全性问题,大家都不这么做。
Corning公司在他们的Protocol中推荐过滤除菌,但是注意,一定不能用普通的醋酸纤维素膜或PET膜的无菌滤器,不能耐受DMSO的腐蚀。应该用RC膜或聚四氟乙烯膜无菌滤器过滤除菌。Corning公司有专门的产品出售,14元一个。

ylcui发表于 2012-09-14.23:33:00
怎见得您买来的DMSO就是无菌的呢?请看看国外的一些Protocols吧。
科学实验不能够想当然,一定要参考文献,除非您做的是独创性的工作,需要建立新的试验方法。否则不按常规方法操作,试验的结果,很难为国外同行认可。

Coring公司的参考资料:(有关内容在第4页)
cuturl('http://www.corning.com/LifeSciences/pdf/t_cryoanimalcc.pdf')

以下论述摘自NUNC公司的一个小册子,Cryopreservation Manual,在cuturl('http://www.nuncbrand.com/')可以找到。

Glycerol and DMSO should be of reagent grade or better,
sterilized prior to use, and examined for undesirable properties.
Each lot should be examined for toxic properties by exposing
sensitive cells to concentrations previously used with success.
Glycerol may be sterilized by autoclaving for 15 minutes at
121°C and 15 psig. Glycerol should be protected from light
during storage. DMSO must be sterilized by filtration using a
0.2-micron nylon syringe filter or a Teflon PTFE* syringe filter
which has been pre-washed with alcohol and rinsed with
DMSO. Cryoprotective agents should be prepared in singleuse
volumes to minimize the risk of contamination and moisture
introduction with repeated use from one container.
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freeleaf_cb发表于 2012-10-12.23:24:13
sigma的DMSO本身就是无菌的,如果操作合适,自然没有问题,但是我想DMSO还是会污染的,因为我也看过corning的文献,正如版主所说,建议用尼龙膜过滤,如果没有污染的可能,自然人家也不会这样说了,还是按规范来吧,我觉得国内的同行们有时的确欠缺严谨的科学态度,我也是这样,希望大家互相督促,真正的把我们的素养提高,不要老是追在别人的屁股后面,诸位没有看到吗,小日本今年获得了两个诺贝尔奖阿,应该惊醒了。

ylcui发表于 2012-10-13.01:03:58
freeleaf_cb朋友说的好,科学精神和学术素养是需要日积月累的。虽然现在我们的学术刊物的SCI影响因子超过日本,但并不说明我们的科学研究领先于人家。关键是学术界整体的素质和水平,还比较差。

现今中国的社会处于转型时期,整体比较浮躁,我真希望各位朋友能够静下心来,不为这种浮躁风所动,在象牙塔中默默耕耘,终究有一天会取得成就的。
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nn255[使用道具]
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另外,如果用于细胞冻存的话,甘油也是可以的。只不过对于某些细胞来说,效果不如DMSO。
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可以高压的
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tangxin_80[使用道具]
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可以不要消毒
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BOSS2011[使用道具]
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我们实验室一直用国产的DMSO,高压蒸汽消毒没有问题.我们的细胞复苏效果不错.
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