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标题:【讨论帖】一种细胞检测MTT法改良试剂测评

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请问有谁知道IC50和IC90的含义?
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the IC50 (or EC50 - effective concentration 50%) is the concentration required for 50% inhibition.
the IC90 is the concentration required for 90% inhibition.
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西子[使用道具]
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广州暨南大学发表的一篇文献:
碱性成纤维生长因子对生长板软骨细胞增殖与分化的影响
中国生物工程杂志 2005,25(2):19-24
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西子[使用道具]
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此方法的正式说法是?总不能叫改良MTT法吧?cck法?wst-8法?
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我也打算做细胞培养的实验,需要进行细胞活力测定,请问现在还可以免费实用这个试剂盒吗?它的保质期是多长时间?如果不可以免费实用那么邮购价格是多少?
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西子[使用道具]
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对于贴壁细胞是否同样具有优于mtt的效果?
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可以免费试用,此方法的正式说法是wst-8法,
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注意事项
1、培养时间根据细胞种类的不同和每孔内细胞数量的多少而异。一般情况下,白细胞较难染色,因此需要较长的培养时间或增加细胞数量(~105个细胞/孔)。悬浮细胞与贴壁细胞相比较难染色。对于悬浮细胞,在培养1-4小时后,可先从培养箱中取出,目察染色程度或用酶标仪测定决定。若染色困难,可将培养板放回培养箱,继续培养数小时后再确定。染色的最佳时间可定为悬浮细胞的最佳培养时间。对于贴壁细胞,培养时间一般为1-4小时,但在培养30分钟左右即可取出目察染色程度(根据细胞种类而定,需要摸索一下条件)。
2、注意不要将气泡带到孔内,否则会干扰观察读数。
3、96孔板在培养箱中,由于湿度不够,而培养箱由于具有一定的温度,使得边缘的孔水分蒸发较快,导致培养基中各种成分浓度变化增大,导致细胞状态不同。对于这种现象,要保证培养箱中的湿度,减少开关培养箱的次数和时间。
4、注意细胞悬液一定要混匀,以避免细胞沉淀下来,导致每孔中的细胞数量不等,可以每接几个就要再混匀一下。
5、为了减少误差,培养板的四边孔只加培养基或只接种细胞,而不作为指标检测孔。
6、建议采用多枪头的移液器,可以减少平行孔中的差异。
7、在用移液器加 CCK-8试剂时,速度要快,减少试剂在移液器上的残留。

计算抑制率公式:(对照-给药)/(对照-本底)*100%.
对照:加细胞、培养液、加溶解药物的介质、CCK-8
给药:加细胞、培养液、不同浓度的药物、CCK-8
本底:只加培养基、CCK-8
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我看到有几篇使用样品发表的论文:
生肌散拆方丹参素对肉芽组织成纤维细胞的生物学作用
中国美容医学 2005 Vol. 14 No. 1
IL-6下调血管内皮细胞组织因子抑制物表达
第二军医大学学报 2005 Vol. 26 No. 2
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BUK[使用道具]
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我已经试用过了,同MTT做的比较,
1.使用方便,加上后,作用一定时间就检测
2.比MTT灵敏,结果很明显,我已给楼主发过去了,请查收
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