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标题:【讨论帖】一种细胞检测MTT法改良试剂测评

dotaaa[使用道具]
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我还想问一个问题:介绍中说“无需再用缓冲液或培养基进行稀释”这是不是指在加CCK-8之前不需要把原来的细胞培养液去掉,不需要用KRB冲洗就可以直接加。
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66+77[使用道具]
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一般情况下是这样的,但也要看你的培养液情况(pH或颜色是否发生明显变化),若发生明显变化,则要更换新的培养液
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dotaaa[使用道具]
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QUOTE:
原帖由 66+77 于 2012-10-19 12:31 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '%s')
一般情况下是这样的,但也要看你的培养液情况(pH或颜色是否发生明显变化),若发生明显变化,则要更换新的培养液

我用WST-1的时候,就是必须去掉原来的培养液,然后加入Krebs-Ringer' buffer缓冲细胞,然后再加WST-1进行反色反应。如果这个CCK-8不用这样的操作,那真的是非常之方便。
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WST-1和WST-8,CCK-8都是Dojindo开发的
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dotaaa[使用道具]
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我在国外,但是研究室里只有我一个人用这个方法。其他人都是用trypan blue。

去年夏天用过WST-1。效果不是很好,也许是因为没有很好的掌握96孔平板离心技巧吧,细胞损失得比较厉害。
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baidukk[使用道具]
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我现在在做细胞增殖的实验,尝试过MTT,感觉效果不是很好,今天上网看到你们的信息,很想尝试CCK-8,如果效果好的话,可能要大量试剂,希望你们能给予帮助,提供试用。我的电话是022-88328682,email:ourkelly@163.com,邮编:300070,地址:天津医科大学83#.谢谢!!
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楼主您好,我是复旦大学的博士生,前段时间我也用MTT方法检测过细胞的增值情况,但效果不太好。特别是我用一种重组细菌抑制一种肿瘤细胞的生长,因为这种细菌本身可能也要与MTT结合,所以致使结果不理想。你有好办法去掉细菌本身结合的MTT对结果的影响吗?再有你们的免费试剂能够克服这个问题吗?现在你们还有免费试剂及protocol吗?如我用得好的话,以后改用你们的产品吧!
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bgf5[使用道具]
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你好,我是中南大学遗传药理研究所的硕士,目前从事U937细胞培养方面的工作,做增殖实验MTT结果不稳定,想尝试CCK-8,我的联系地址已经发到你的邮箱,请查收,谢谢!
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66+77[使用道具]
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CCK-8也需要设空白对照:与实验孔平行设,不加细胞,只加培养液的空白对照,最后比色时,以空白孔调零。
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66+77[使用道具]
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给各位群友提供一些cck-8在国外发表的文章。好东西大家一起分享;)
1
YOSHIMASA INOUE, MASASHI TOMISAWA, HITOSHI YAMAZAKI, YOSHIYUKI ABE,HIROSHI SUEMIZU, HIDEO TSUKAMOTO, YASUSHI TOMII, MASAFUMI KAWAMURA, HIROSHI KIJIMA,HIROYUKI HATANAKA, YO***O UEYAMA, MASATO NAKAMURA and KOICHI KOBAYA***he modifier subunit of glutamate cysteine ligase (GCLM) is a molecular target for amelioration of cisplatin resistance in lung cancerINTERNATIONAL JOURNAL OF ONCOLOGY 23: 1333-1339, 2003
cuturl('http://virology.med.uoc.gr/IJO/2003/volume23/number5/1333.pdf')
2
Kazuhiro Takahashi, Kazuhito Totsune , Tomomi Kitamuro, Masahiko Sone, Osamu Murakami and Shigeki ShibaharaThree vasoactive peptides, endothelin-1, adrenomedullin and urotensin-II, in human tumour cell lines of different origin: expression and effects on proliferationClinical Science, 103(48), 35S-38S (2002).
cuturl('http://www.clinsci.org/cs/103/035S/103035S.pdf')
3
Isabelle I. Salles, Amy E. Tucker, Daniel E. Voth, and Jimmy D. BallardToxin-induced resistance in Bacillus anthracis lethal toxin-treated macrophagesPNAS October 14, 2003 vol. 100 no. 21 12426–12431
cuturl('http://dpalm.med.uth.tmc.edu/courses/MicPath2004/Articles%5C13Salles.pdf')
4
Hiroki Shimura, Hideyo Suzuki, Asako Miyazaki, Fumihiko Furuya, Kazuyasu Ohta, Kazutaka Haraguchi, Toyoshi Endo and Toshimasa OnayaTranscriptional Activation of the Thyroglobulin Promoter Directing Suicide Gene Expression by Thyroid Transcription Factor-1 in Thyroid Cancer CellsCancer Res., 61, 3640-3646 (2001)
cuturl('http://cancerres.aacrjournals.org/cgi/reprint/61/9/3640.pdf')
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