【分享贴】版主发福利啦~细胞荧光染色照片欣赏 - 经验共享

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标题:【分享贴】版主发福利啦~细胞荧光染色照片欣赏

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发表于 2012-10-22 15:07 资料个人空间短消息加为好友

小中大

如何染的？这么漂亮。可以共享一些方法吗？

————————————————————————————————————————————————————————————————

我是先配染液，是AO(100mg/ml),EB(100mg/ml)1：1混合液
染色前作细胞爬片，我是在六孔板中作的，一个孔正好放一片玻片，弃营养液，PBS洗两遍，加入2mlPBS同时加入80ul的染液，避光染色20ml,然后再用PBS洗两遍以去掉多余的染料，取出玻片倒扣在载波片上置荧光显微镜下观察。

园丁##[使用道具]
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发表于 2012-10-22 15:08 资料个人空间短消息加为好友

小中大

请问荧光染色是不是要花很多钱？

———————————————————————

主要是荧光显微镜的问题，其他都好办的。赫赫

园丁##[使用道具]
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发表于 2012-10-22 15:08 资料个人空间短消息加为好友

小中大

呵呵，接着发
大家看看，这样的细胞算不算凋亡？

附件

2012-10-22 15:08

36649994.jpg (27.11 KB)

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发表于 2012-10-22 15:09 资料个人空间短消息加为好友

小中大

我有一个挺傻的问题：我以前也做过贴壁细胞的染色，但我是消化细胞后甩片。因为我觉得药物作用后，有些细胞不贴壁了（呈悬浮状，可能是死亡了），所以我觉得如果用爬片的话，是不是结果不是很准确，因为人为的排除了一部分死亡或凋亡的细胞。不知我的想法对不对，请指教。

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发表于 2012-10-22 15:09 资料个人空间短消息加为好友

小中大

我们这以前没人作过这方面的东西，有荧光显微镜，但是没人会用，我照着说明书做，但是怎么也找不到紫外光，就是看不见细胞核的荧光。麻烦告诉一声，谢谢了。

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发表于 2012-10-22 15:10 资料个人空间短消息加为好友

小中大

原来高人在此处，侬的照片真的很清楚，想问一下侬用的荧光显微镜是奥林巴斯的吗？AO/EB染色观察时选用什么模块，即激发波长和阻断波长各是多少，我也做过一次，总觉得颜色和你们的结果不相同，不知是不是模块选错了。

附件

2012-10-22 15:10

19411342.jpg (31.97 KB)

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发表于 2012-10-22 15:10 资料个人空间短消息加为好友

小中大

请教版主
我们这以前没人作过这方面的东西，有荧光显微镜，但是没人会用，我照着说明书做，但是怎么也找不到紫外光，就是看不见细胞核的荧光。麻烦告诉一声，谢谢了。

————————————————————————————————————————————————————————————————

首先要打开紫外光源，不是普通光源，一般是高压汞灯光源；其次要选择好模块，不同的染料需要不同的激发波长和阻断波长，使用紫外光源时要将可见光源暂时关闭。

ending[使用道具]
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发表于 2012-10-22 15:10 资料个人空间短消息加为好友

小中大

请问要做药物处理后的悬浮细胞是否凋亡，可以用荧光染料H33258，可不可以用H33342，两者做起来方法上有区别吗？试剂贵吗？只要做一点点，有小包装的吗？谢谢高手先！

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发表于 2012-10-22 15:11 资料个人空间短消息加为好友

小中大

我有一个挺傻的问题：我以前也做过贴壁细胞的染色，但我是消化细胞后甩片。因为我觉得药物作用后，有些细胞不贴壁了（呈悬浮状，可能是死亡了），所以我觉得如果用爬片的话，是不是结果不是很准确，因为人为的排除了一部分死亡或凋亡的细胞。不知我的想法对不对，请指教。请有空的时候回答一下，谢谢！

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