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标题:【讨论帖】看图说细胞－状态好坏鉴别

abc816[使用道具]
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发表于 2012-10-22 15:31 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

请教：在培养液中加入Heps和谷氨酰氨的浓度是多少，还有我现在有Heps和谷氨酰氨粉末，把它们配成百分之几的浓度，用什么配啊，是三蒸水吗
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穿越时空[使用道具]
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发表于 2012-10-22 15:31 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

我们的配方是： (2x1000ml)
RPMI Medium 1640, 10.4g, 2x1袋
L-Glutamine, 2mmol/L, 2x300mg
2-Mercapto-ethanol, 50umol/L, 2x3.9ul
Pyruvic acid, sodium salt, 1mmol/L, 2x110mg
Hepes Free acid, - 2x1.5g
Sodium bicarbonate, - 2x1.5g
Gentamyoin sulfate injection,50 U/ml, 2x50000 U
DDW ==>2x1000ml
pH ==>7.2
立即，0.22um 滤菌==>高压==>4度密封保存
用前加10%NBS。
一到两个月，需要往保存的1640中加原量的L-Glutamine（分解了）。

我们的前辈，是个超级细胞高手，强烈推荐所有试剂都用进口的（特别是前四个）。

我们用的很好，不知在你们那怎样，试试吧。
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一叶[使用道具]
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发表于 2012-10-22 15:32 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大


QUOTE:
原帖由 穿越时空 于 2012-10-22 15:31 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '%s')

我们的配方是： (2x1000ml)
RPMI Medium 1640, 10.4g, 2x1袋
L-Glutamine, 2mmol/L, 2x300mg
2-Mercapto-ethanol, 50umol/L, 2x3.9ul
Pyruvic acid, sodium salt, 1mmol/L, 2x110mg
Hepes Free acid, - 2x1.5g
Sodiu ...

注意：一般用0.22um滤膜滤过后，已经达到无菌要求，不需要高压的。
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BUK[使用道具]
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发表于 2012-10-22 15:32 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

不能高压,一高压那些营养成分都变性了。一般在无菌状态下经滤膜除菌就行。
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mamamiya[使用道具]
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发表于 2012-10-22 15:33 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
不错！不错！

收获很大！可以拿出来当样板给初学的看图学养细胞了。
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穿越时空[使用道具]
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发表于 2012-10-22 15:33 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
多谢楼上几位及时指正，的确是我大意写错了。希望没有给你带来损失。
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ALALA[使用道具]
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发表于 2012-10-22 15:34 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

合适的离心速度和时间!
不要携带太多的分离液!
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duoduo[使用道具]
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发表于 2012-10-22 15:34 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
我看了你的图，很好很好，记得以前我也见过这样的情况，可惜没有楼住这样敬业，把照片都贴出来了，辛苦了，建议加分！！！！！！！
实验最基本的是细胞培养，最关键的也是细胞培养，我也在养人 T细胞，是我自己的细胞，看者它们生长，就象看者自己的孩子一样，呵呵。毕竟是从自己身上抽出去的，不想它们就象照片上那样，变的面目全非啊。
希望能和楼主互相交流，多多指教啊。

————————————————————————————————————

你好，能否请教一下人T细胞如何培养吗？我也准备养，但不知如何做准备。
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阿k[使用道具]
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发表于 2012-10-22 15:34 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

我想请教一个问题，对于悬浮生长的细胞，在培养方面，是细胞浓度高些还是细胞浓度低些对细胞状态、增殖有利呢？
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shenkunjie[使用道具]
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发表于 2012-10-22 15:35 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
干得好！细胞培养这种事情本来就是需要我们平时多下点功夫,经验的积累才能培养出真正的本领！，加油哟，各位！
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