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标题:【求助】我配的冻存液的配方对么？

Ao7[使用道具]
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发表于 2012-10-31 12:36 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
不同的细胞好像冻存液各有不同。

我们冻悬浮细胞(Raji, Jurkat) 1640:NBSMSO=4:5:1。
推荐现配，但是4度，两周，好像也没问题（至少我的经验是这样）。

我们这有些人养贴壁细胞，冻存液1640:NBSMSO=7：2：1。
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chuntian1983[使用道具]
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发表于 2012-10-31 12:37 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

90％的血清？这个配方好像有问题吧，我们培养细胞血清的浓度多不能超过20％，血清多了对细胞是有毒性的，我们这是10％的dmso 配上90％的含20％的RPMI 1640
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发表于 2012-10-31 12:37 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
为什么我们这里的DMSO是粉剂？
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kewanqi2011[使用道具]
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发表于 2012-10-31 12:38 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
冻存液放4度可以长期使用的，我一直都没甚末问题。我用的使DMEM培养基，冻存液配方是（10ml）：7mlDMEM ;2mFBS;1mlDMSO 效果一直挺好

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为什么你们都不放在-20度呢？
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fei1226com[使用道具]
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发表于 2012-10-31 12:38 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

一直放4度可以没问题，推荐使用1：9，两种都用过，发现1：9死亡率低。-20，血清反复冻融会降低效价，此外，DMSO有时室温都会凝固，所以，建议配制前加热溶解。温度37度左右时配制。
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发表于 2012-10-31 12:38 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
ATCC上一般冻存液配方是DMSO：完全培养基＝1：9
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S6044[使用道具]
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发表于 2012-10-31 12:39 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

求精子的冻存液配方。我用甘油加蛋黄，复苏效果不好，请问各位用什么，谢谢
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misswu61[使用道具]
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发表于 2012-10-31 12:39 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
90％的血清？这个配方好像有问题吧，我们培养细胞血清的浓度多不能超过20％，血清多了对细胞是有毒性的，我们这是10％的dmso 配上90％的含20％的RPMI 1640

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DMSO:FBS=1:9，是一种通用的冻存液配方，使用没有问题。我们实验室一直按这个操作的。
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yapuyapu[使用道具]
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发表于 2012-10-31 12:40 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

我觉的你可以上Cell Line Data Base：cuturl('http://www.biotech.ist.unige.it/interlab/cldb.html')上查找你的细胞株，看看最适宜的冻存液配方，我们实验室一直用10%DMSO+20%FBS+70%RPMI 1640，效果不错！
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chuntian1983[使用道具]
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发表于 2012-10-31 12:40 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

一般而言，细胞冻存液中DMSO浓度为7％～9％，可用纯血清或完全培养基；冻存液最好现用现配。
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