小中大很有可能是黑胶虫,我以前也遇到过,这个东东据说是玻璃培养瓶中的类似氧化硅的东西(曾经有文献报道过)。特征:高倍镜下呈现明显的布朗运动,2. 细胞状态好的时候,这种黑胶虫很少或看不到;
3. 细胞数量较少或黑胶虫多的时候导致细胞大批死亡,尤其是刚复苏的细胞中有的话,基本上这瓶细胞是废了。
4. 常规换液或添加常用的抗菌素(青链霉素)对其无效。
我们的解决办法:
1.是换好一点的血清(我觉着和血清的关系不大)。
2.如果是贴壁细胞的话,可用无菌的PBS洗几次,可一定程度上缓解。若是悬浮的话,就不太好处理拉,可以向其中少加一点滋养细胞(从小鼠腹腔内取的巨噬细胞,这种细胞不分裂,过一阵就死掉了,做抗体杂交瘤融合的同志肯定知道~~)。加滋养细胞对有黑胶虫的刚复苏的细胞很有效!还有就是实验环境要注意好,保持细胞间整个环境的洁净度~~。
3.换用进口的一次性塑料培养瓶。
以上就是我们的办法了,效果还是不错的。