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标题:【求助】请教DMSO!

am10[使用道具]
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【求助】请教DMSO!


我用DMSO溶解中药后,再稀释结果药全析出来了。我是1ml的DMSO溶解后,加9ml的生理盐水,本想以此作为母液,做的时候再培养液稀释到所需浓度。谁知全析出来了,浪费了好多。
我想问一下各位大虾是怎么做的?出现过这种情况吗?         我想真的干预的时候,培养液与DMSO的体积比远大于9:1,也就是说DMSO的浓度更稀,岂不是析的更多?
还有DMSO不能直接往细胞里加,会放热,那该怎么办呢?

问题太多,谢谢大家帮忙!!!
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ladyhuahua[使用道具]
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我想真的干预的时候,培养液与DMSO的体积比远大于9:1,也就是说DMSO的浓度更稀,岂不是析的更多?

————————————————————————————————————————————————————————————————

但是,你也别忘了这时候,药物的浓度也被稀释了很多哦。
如果,配不了太高浓度的母液,那么,你只有把母液浓度调低一些,一般原则上,是使培养液中终浓度的DMSO不超过0.1%,当然也有人说0.5%的,可以参考这个帖子。显然你的母液浓度配得实在太高了。我们一般都加几百微升的DMSO,逐渐加上去的。另外,最后加药的时候,你可以用培养基来稀释药物。
DMSO直接往细胞里加会放热吗?这个我还真不知道呢?不过,应该是不会的吧,否则冻存细胞采用10-20%的DMSO浓度,那不是把细胞全烧死了吗?呵呵!
cuturl('http://www.dxy.cn/bbs/post/view?bid=66&id=1093757&sty=3&keywords=DMSO%C5%A8%B6%C8')
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qqq111[使用道具]
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DMSO加到培养基中是会放热的!冻存的时候应该要先将含DMSO的冻存液预冷至4度,这时候DMSO对细胞的毒性也是最小的
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qqq111[使用道具]
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我们一般用DMSO配置200*的原液,终浓度0.5%,加药的时候,平皿倾斜,在叶面最高处加药,这样距离细胞会远也,加入后立即混匀,避免局部浓度过高。有时候,有一些沉淀关系不大。
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沉淀析出,也就是药析出来了,怎么会没影响呢?怎么才能保证没沉淀呢?是不是DMSO的终浓度越低越好?
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mysmdbl[使用道具]
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DMSO跟水是互溶的,一般药物溶解在DMSO中以后,再用水溶剂稀释的话,应该不会析出的。你的药物析出会不会还有其他的问题。
另外,我做实验的时候也曾经遇到DMSO加到完全培养基里时溶液温度上升,可能真的存在放热的问题。
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你为什么要用生理盐水稀释药物呢,细胞培养中有用审理盐水的吗?
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另外是否能溶解主要是物理和化学的问题,先要知道你的药物主要的物理化学性质,蛋白质类与盐溶液混合可能析出沉淀(盐析),盐水中含钠氯,你的药物中含有的离子成分是否有关系,不会含银吧
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小糖块[使用道具]
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DMSO加入细胞确实会放热,我曾经用DMSO稀释药物以后静脉腹腔注射大鼠,结果大鼠一会就死掉了,可惜呀。

至于析出,药物是不是能够在DMSO中完全与药物本身的特性有关,我认为要逐渐加入DMSO,当药物完全溶解后停止。试验时用培养基稀释,由于DMSO与水是可以混溶的,大比例稀释的情况下应该没有析出。

我的实验就是这样。
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eric930[使用道具]
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看看我说的对不?
第一:用DMSO来降低储存液的浓度肯定不行,储存液一般必须高浓度,否则影响药物保存期。而且,DMSO浓度高了对实验也是有不良影响的。
第二:药物要求用DMSO溶解,说明在水中溶解度差一些。要把含有药物的DMSO1ml一下加入9ml水里,药物必然析出。应该这样,取水0.5ml放入一个离心管,然后向其内加含有药物的DMSO1ml,并吹打,至无沉淀,再向其内加水8.5ml,这样药物就不会析出,别看都是一样的量,加的方法不一样,效果大不相同啊。
虽然是细节问题,对实验却是很重要的。
这是我百试不爽的方法,对于有类似问题的战友会有帮助吧?呵呵。因此斗胆要求斑竹给加分鼓励,呵呵。
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