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胞内抗原标记

最近在做肿瘤细胞的胞内抗原标记，打算做流式分选。用的是BD的荧光抗体和破膜剂Kit，按照Kit的说明书操作之后，发现抗体没有标记上去。之前没有太多的细胞生物学实验基础，不知道问题出在哪儿，求高手指点！！！