小中大
各位大侠大家上午好！我现在做的侵袭实验，我把我的实验步骤写出来，大家帮我分析一下，看存在什么问题，请大家指教，谢谢：
1.药物血清作用细胞24h以后，消化下来以10*10 4/ml铺在Transwell小室，上室100ul小室600ul 10% FBS
2.孵育24h 以后（还有的是12h).PBS 洗2遍，无水酒精固定30min,棉签小心去掉上室的细胞，风干后，苏木精染色15min，PBS冲洗2遍，1%盐酸酒精分化3-5s,PBS冲洗2遍，风干后伊红染色5min,PBS冲洗风干后显微镜下观察并照相
3.照相取5个视野，并计数取出平均值（显微镜观察时，把小室的正置于24孔板上，荧光倒置显微镜观察）
4.小室取出放到超声波里面洗涤1h,取出后紫外照射30min,继续使用。
这便是我的实验步骤了，但是染色后细胞核和细胞质都很红，分不出来，不漂亮；另外我之前只固定30min后用苏木素染色30min的时候，就是很蓝（紫）本人有点色弱，细胞核染出来了，可以分清楚，但是膜底色也很深，也不是很漂亮，所以请求大家给出宝贵意见，谢谢！！！
愿大家实验顺利进行，实验愉快！！！
Waiting for ur reply!
