细胞世界

我做迁移试验，结晶紫染色。染色后我在显微镜下可以看到成片的细胞但是就是没被染色
做了两次都出现这种情况，请大家帮忙分析一下吧

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是否染色时间太短？或者你根本没有看到细胞，而是膜上的那些小孔？我是这样染的，你可以参考：
结晶紫用甲醇配成0.5%的母液，使用浓度为0.1％，用PBS按1：4稀释后即为染色液。
染色方法:用PBS缓冲液洗细胞1-2次,吸尽残余的液体，加入甲醇固定20分钟,弃固定液,加入结晶紫染液,染色10-20分钟,弃染色液,用PBS冲洗干净即可！

同志们，帮忙解答一下吧，我用了好多板子了，也试过加1％，0.5 %血清试图帮助细胞贴壁伸展成梭形，但negative control的细胞迁移很明显，不能做对照了，我还没试过加BSA，听说是为了维持细胞渗透压？不太懂···
有什么方法能让细胞在上层分散的好些呢？我看了站上大家的经验，有人说小室要平衡过夜，但这是针对已有涂层的膜还是我这种自己铺gelatin的呢？还有同志说是gelatin没铺好，那东西不就直接望上挤，摇都摇不动，应该不会不均匀啊？，小室也真的很小（24 well），我晃匀后放段时间细胞还是按自己喜好一陀一陀的分布，哭都哭不出来···
请战上高手帮忙，不甚感激啊！
细胞migration一定要先在膜上拉出漂亮的梭形吗？有点子···

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细胞密度不要太高，加入后米字形摇匀应该可以解决你的问题。

请问有没有知道 BD公司的Matrigel保质期有多长时间？(-20度保存）说明书上只说stable for a minimum of 3 months from day of shipment when stored at -20℃.我有-20℃存放两年的Matrigel(师姐留下来的）现在还能用吗？

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情况和你差不多，用后感觉还好。