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标题:【分享帖】细胞培养减少污染的小细节

wu11998866[使用道具]
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养细胞我认为主要是无菌操作习惯的形成。我们这边的一个老师说过,“能不用手的地方就不用手”很贴切的。习惯好了想污染也难的。
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8princess8[使用道具]
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细胞培养和外科手术有类似之处,就是要有严格的无菌观念,这样细胞就不容易污染了。最容易导致污染的是操作者的双手,个人认为不必戴手套,因为操作起来不是很方便,但时刻要保持手的消毒,并避免接触瓶口等部位。另外环境卫生、物品消毒等也要务必注意!
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remenb[使用道具]
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学习了 ~
准备东西时齐全一些 万一掉了或者污染了就不能简单烧烧再用
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plaa[使用道具]
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去细胞室必须穿白大褂,这是态度问题。

传细胞前,培养液,PBS,胰酶的瓶口都要用酒精擦下,台面也要用酒精擦干净。
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ququer787[使用道具]
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不错,有的很多的细节值得注意
我现在就在国外,也在培养细胞,他们的细胞培养室确实是没有酒精灯的,也没有紫外,只是通风厨一直开着,做实验之前先用酒精擦拭里面的台面,先充分洗手在用酒精擦手,就ok了
真的比国内简单多了,我看过他们老美做实验,在里面边做实验,边聊天,合作普通实验一样,相反是我们这些国内的在里面做实验,就专心的做,从来不聊天,
呵呵,国内养成的习惯
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JK.jon[使用道具]
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好的超净台比什么都可靠
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3648755[使用道具]
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细胞污染缺失有时候说不清,可能自己很注意也会污染,而别人感觉随随便便也能做得较好。
我的体会是,操作注意一点防患于未然没什么不好,总比污染了回过头再去纠正手法改变习惯要好得多。
我也贴一点:
无菌操作注意事项:
1.凡是带入超净工作台内的酒精、PBS、培养基、胰蛋白酶的瓶子均要用75%酒精擦拭瓶子的外表面。
2.靠近酒精灯火焰操作。
3.器皿使用前必须过火灭菌。
4.继续使用的器皿(如瓶盖、滴管)要放在高处,使用时仍要过火。
5.各种操作要靠近酒精灯,动作要轻、准确,不能乱碰。如吸管不能碰到废液缸。
6.吸取两种以上的使用液时要注意更换吸管,防止交叉污染。
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gemei0115[使用道具]
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感谢大家的经验,不管重不重要,注意一下的比较好。
不过我觉得可能也是环境比较重要,我们条件也很简陋,不戴手套,没有酒精灯,我后来连实验服都不穿了,觉得还没自己衣服干净呢。但是我们的细胞间是单独一间,而且就我一个人,想说话也没人。没事用紫外线照照,消毒水消消毒,都两年多了也没出过啥问题。
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ROSE李[使用道具]
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1,反复的洗手加喷酒精,为什么不带乳胶手套?夏天还好,冬天如何?男生皮糙肉厚还好,女生细皮嫩肉如何?不要说乳胶手套贵,比起反复的仍细胞便宜得多。
2,白大褂真的有那么干净吗?我一般都不穿白大褂,尤其夏天,热是其一,没必要是其二,穿白大褂那是为了防护自己。
3,超净台照紫外是步骤一,吹20分钟是步骤二,步骤二的重要性远大于步骤一。
4,说话对细胞培养是没有任何影响的,只要不影响到你的操作。大家一起边做细胞,边聊天,其乐无穷。
5,我倒认为save是做细胞的一条基本原则。至于细胞生长异常要具体问题具体分析,有些细胞你是仍不起的。

呵呵, 尖锐些,别介意。
实验小心一些是好,但不要因而缩手缩脚,会吓走一批人。

大家可能都听过这样说法,很多国外的实验室,养细胞的人很随便,不用穿白大衣,也不用酒精灯,我没有这样的经历,但是我一个刚刚回国的朋友就是这样做的,细胞几乎没污染过,我们讨论了一下原因,最主要的就是空气质量的问题,我们的环境差,污染的几率就会大增。所以平时的时候,我们实验室就是每周都要用过氧乙酸全面清洁,一旦多个人的细胞出现污染的情况,就必须全面清理消毒培养箱,不要把细胞扔了就算了。还有,我硕士养了2年细胞博士养了3年细胞,从来没有带过手套(除非手受伤了),我们的水池就在细胞间门口,洗完手直接进去,实验室的同学都是这么做的,细胞都长得很好。手套也是污染源之一,我们国内大多数实验室没有经济实力购买外科手术用的几块钱1付的手套,很多几毛钱1付的手套都不是无菌的,有的实验室更是节省,1副手套用坏为止,这样反倒增加了污染机会
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shenkunjie[使用道具]
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我好几次时间紧照完台子没有吹,不知道影响会多大啊
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