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标题:【分享帖】"黑胶虫"图片

duoduo[使用道具]
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(摘自hyclone中国网站)

有关血清使用中的常见问题解答

有关血清的问题,数十年来我们始终面临的是同样的问题。因此,我们特别整理了一些实验室里常会遇到的问题,供大家参考:

1.保存血清最好的办法?

我们建议血清应保存在-5℃至-20℃。若你一次无法用完一瓶,建议您无菌分装血清至恰当的灭菌容器内,再放回冷冻。

2.如何解冻血清才不会使产品质量受损?

我们建议您将血清从冷冻箱中取出后,先置于2-8℃冰箱中使之溶解,然后在室温下使之全溶。但必须注意的是,溶解过程中必须规则地摇晃均匀。

3.血清解冻后发现有絮状沉淀物出现,该如何处理?

血清中沉淀物的出现有许多原因,但最普遍的原因是由于血清中脂蛋白的变性造成的;而血纤维蛋白(形成凝血的蛋白之一)在血清解冻后,也会存在于血清中,亦是造成血清沉淀物的主要原因之一。但这些絮状沉淀物,并不影响血清本身的质量。

若您欲去除这些絮状沉淀物,可以将血清分装至无菌离心管中,以400g稍微离心,上清液即可接着加入培养基内一起过滤。我们不建议您以过滤的方法去除这些絮状沉淀物,因为它可能会阻塞您的过滤膜。

4.何谓热灭活?有必要做热灭活吗?

一般以56℃,30分钟来处理已解冻的血清,因为此加热步骤,可以使补体去活性,而补体所参与的反应有:溶细胞活性,平滑肌的收缩,肥大细胞和血小板组胺的释放,增强吞噬作用,淋巴细胞、巨噬细胞的趋化和激活。

实验显示,经过正确处理的热灭活血清,对大多数的细胞而言是不需要的。经过处理的血清对细胞生长只有微小的促进,或完全没有任何作用,甚至通常因为高温处理影响了血清的质量,而造成细胞生长速率的降低。

而经过热处理的血清,沉淀物的形成会显著的增多,这些沉淀物在倒置显微镜下观察,像是“小黑点”,常常会让研究者误以为是血清遭受污染,而把血清放在37℃环境中,又会使此沉淀物更增多,使研究者认为是微生物的分裂扩增。

因此我们建议您,若非必须,您可以不需要做热灭活这一步。如此以来,不但节省您宝贵的时间,更确保您血清的质量!

5.如何避免沉淀物的出现?

我们建议您在使用血清的时候,注意正确的血清解冻步骤,并尽量避免灭活血清及长时间的将血清置于高温环境中。

(摘自hyclone中国网站)
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小野花[使用道具]
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cuturl('http://www.dxy.cn/bbs/post/view?bid=76&id=10755948&sty=1')
我在分离成体动物脑部神经干细胞时也发现过小的生物。也不能确定其为何物,我已经在园子里发过帖子问了。这种细胞在最初似乎有增殖及形态变化,到半个月后大量死亡,最后消失。
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www.1[使用道具]
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我也遇到过这种可恶的黑胶虫,我对付它的办法是在培养液中加入高浓度的庆大霉素和阿米卡星,多换培养液。
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00无名指00[使用道具]
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纳米细菌这种东西值得关注。
cuturl('http://www.dxy.cn/bbs/thread/11152390')
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yysr238[使用道具]
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感觉"黑胶虫"这样具有争议的问题还是拿到园子里来讨论更有意思一些.我们平时在实验室里做实验,交流起来也都是小范围的,现在听了这么多战友们的观点,真的觉得受益非浅!!

昨天对moliang战友所说的"纳米细菌"非常感兴趣,特地在数据库查了相关文献,该文章指出“纳米细菌不能用普通微生物培养基培养,但能用细胞培养基培养”,“纳米细菌具有细胞毒性,以特殊方式入侵动物细胞”,将这一篇《纳米细菌研究进展》传上来与大家共享。

PS:无论如何,不管这样的物体是否为生物活性物质,究其原因都与血清及其使用有关,个人认为我们在做细胞培养的时候,还是应该合理使用血清,一船星辉战友转帖的hyclone血清使用规程很有帮助。
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阿敏[使用道具]
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PLoS Pathogens上关于纳米细菌的一篇综述,有意思的是下面的东西。

Another obstacle to the equitable assessment of the evidence is the fact that its main contributors have—legitimately—started a diagnostics and pharmaceutical business enterprise, and their papers do not always state their business connections.

Kajander himself recently admitted that the bacterial status of NB is still lacking satisfactory evidence, and he concedes that the term “calcifying nanoparticle” best describes the agent [38]; unfortunately, he also still uses the untenable word “nanobacteria”, which landed him in a microbial minefield, as an editorial had rightly foreseen [39].

It is also a fact that nothing has been done to identify or to characterize it, or them; nowhere have we found that NB have been “isolated”, and we know that in the mid-1800s, the revolutionary germ theory of disease would not have been accepted without the cumbersome methods set up by Pasteur for obtaining pure cultures, and it would not have gained impetus without the isolating cultures on the solid media of Koch.

Nanobacteria: Facts or Fancies?
cuturl('http://pathogens.plosjournals.org/perlserv/?request=get-document&doi=10.1371/journal.ppat.0030055')
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junhun[使用道具]
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经常用到,可以用氨基甙类的抗生素抑制,黑胶虫比细菌小,生长缓慢,一般对细胞的状态有影响。
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tie8[使用道具]
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大家好,我养的细胞也遇到类似的情况,背景出现很多的黑点点,现在细胞急用,请教大家最好的处理方法是什么呢?多谢了!
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9900[使用道具]
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我的293也是啊,还准备接种腺病毒呢,这下完了


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summerxx[使用道具]
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是血清的问题,我前段时间也遇到这个问题,把完全培养基滴2ml到六孔板里面,这种碎片同样可以观察到。后来我把培养基和血清换了,细胞救过来了,现在没有再出现这种情况了。希望对你有帮助。
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