小中大网上搜索的“黑胶虫”的特点:
1,具有高速移动特征。而绝不是在原地的抖动,或者布朗运动。(做布朗运动的污染物,请同学们考虑细菌污染或者是细胞碎片!)
2,直径远小于细胞,0.1微米滤膜过滤无效。
3,只能在40倍以上镜头中看到并清晰可见其形体。
4,形状为点状(运动形式为高速窜动),或线状(运动形式为扭动)。
5,与细胞共生并传代,1%~30%青霉素-链霉素双抗均对其无效。
6,与血清质量有关,且很有可能只跟血清有关!网上看到有人鉴定这是一种寄生于牛血清的原虫。(我同学实验室的细胞曾经全部被黑胶虫污染,后来查出原因,是公司在血清分装时污染,后来换用一批血清就好了。)
7, 繁殖快,可在12hr内引起培养液浑浊。
处理
1.换好一点的血清(我觉着和血清的关系不大)。 2.如果是贴壁细胞的话,可用无菌的PBS洗几次,可一定程度上缓解。若是悬浮的话,就不太好处理拉,可以向其中少加一点滋养细胞(从小鼠腹腔内取的巨噬细胞,这种细胞不分裂,过一阵就死掉了,做抗体杂交瘤融合的同志肯定知道)。加滋养细胞对有黑胶虫的刚复苏的细胞很有效!还有就是实验环境要注意好,保持细胞间整个环境的洁净度。 3.换用进口的一次性塑料培养瓶。 4.建议清理无菌室所有物品,重新灭菌,用KMnO4熏蒸,按首次使用无菌室做,细胞重新复苏,。 5. 在换液前先加入生理盐水并轻轻拍打,冲洗干净后再加入培养液,坚持天天洗,传代时加生理盐水再离心一次,接种密度稍大一些,一段时间后,虫子就会大大减少,对细胞的生长也不会有大的影响。 6.有材料称minocycline具有一定的作用,可以和换液结合起来使用。 7.可以用专门的杀黑胶虫培养基。参考:cuturl('http://emuch.net/html/201009/2388102.html') cuturl('http://emuch.net/html/201009/2388102.html')