小中大楼主你好，
我的目的蛋白表达量偏低，做了好一段Westen blot了，结果总不理想。
用5%的脱脂奶粉来孵育一抗和二抗时，基本上没有背景，可也杂不到目的条带；我有个表达丰富较高的正对照，显影可以显出条带，说明整个系统还是没有问题的。
我试过用TBST来封闭一抗和二抗，可以看到有目的条带，但背景又特别高。
那么，
1：我该用什么样的封闭液呢？
2：对于低丰度的目的蛋白，有没有较好的Westen的试验方案呢？
谢谢了
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1，你的目的蛋白提取的怎样？
2，你做的是什么蛋白？磷酸化还是非磷酸化？需要用不同的封闭体系
3，低丰度的蛋白建议采用更加敏感的检测系统（超敏ECL），具体的你可以再问
