小中大谢谢您的帮助,可是我有个不明白的地方。蛋白抽提试剂是什么啊。我的loadingbuffer是2倍的。难道不是提取的200微升的蛋白就加200微升的buffer么。这个怎么把蛋白浓度调一致啊。。用一倍的loading buffer稀释弄的蛋白么?这样把浓度调一致?我用的裂解液RIPA提的组织蛋白。浓度调一致后再煮沸?然后就可以上样?
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1,蛋白抽提试剂就是你的裂解液(lysis buffer or extraction buffer)
2,计算好蛋白浓度,比如10mg/ml,我要调整至终浓度为2mg/ml
那么你可以取10ul 10mg/ml样品+ 15ul lysis buffer + 25ul 2倍loading,终浓度为2mg/ml,变性后电泳(如果换用5倍loading算法请自己去琢磨)