蛋白质与蛋白组学

您好，请问，HRP标记的2抗除了用DAB和ECL显色外，还有什么显色方法，AP标记的2抗呢？用什么方法检测呢？

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HRP标记还可以用在ELISA中，用TMB显色（如果没记错的话）
AP的检测方法好像是BICP/NBT
你自己上网搜搜

不用丽春红染色 直接加一抗孵育！
总是不出结果很是着急，现在二抗都用完了！唉

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用丽春红染色来看转膜效果
别盲目做

你好，我做bcl-2;bax;bcl-xl，刚开始单独做了bcl-2出结果了，但是结果非常不清晰。后来再做一次结果三种基因加上actin结果三种基因都没出结果。共有四个样，actin只显了一个影。
到底是那个步骤出了问题。
我完全按照步骤来。
制胶，加样，电泳，浓缩胶90u,分离胶110u,在分离胶中，buffer及marker分离的断断续续的。
后来就是转膜了，我的基因分子量不大，20多kDa,所以用了恒压50v,1.5小时。再后来就是洗膜，脱脂奶粉封闭1小时。加一抗4度过夜，洗膜加二抗封闭1小时，洗膜再ECL染色。
如果能回复将万分感谢！！！

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1，蛋白提取出来没有
2，转膜后膜上有没有蛋白？
第三才是考虑抗体问题
有兴趣短信息联系
这些我都做过

版主您好，向您请教个问题：我的膜大约30cm2，目标蛋白43kd，请问应该用什么样的条件呢？
我用恒压50v，80分钟，但是感觉效果不是很好。

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湿转还是半干转？
我喜欢用恒流
湿转：300mA 1h
半干 1.2mA 每平方厘米膜面积，1h

你好版主：
我可能没说清楚，现在请教怎样确定上样量的多少呀？

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先跑电泳染胶看条带
看泳道间是否串道
条带是否清晰

老师，您好！
做WB，目的蛋白分子量100kDa，曝光后发现有粗粗的一条带，但这条带位于最上一条marker（250kDa）还靠上的位置，没有其他杂带。请问这是蛋白没有跑下来还是怎么回事？如果是蛋白没有跑下来，哪个环节出现问题会造成这种情况，胶是10%，买的成品应该没有问题。谢谢指导！

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胶要用8%
10%的浓度有些高了

最近在做LPS（脂多糖、内毒素）对HUVEC（脐静脉内皮细胞）刺激后测定ICAM-1的实验。
查过相关的文献，检测ICAM-1蛋白很少有人用Western-Blot的方法，有部分人应用ELISA或流式细胞仪，请问是因为蛋白表达量低使得WB不能检测到？还是有别的原因？
谢谢！

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是不是一种分泌型的蛋白？
你看看这篇文献
cuturl('http://cancerres.aacrjournals.org/cgi/content/full/68/11/4097')