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楼主你好,再一次麻烦你,我现在觉得我的方法有很大的程度上都是错误的。。。。
以下问题想咨询你一下~~
1.铺完分离胶之后用什么封边呢?我用的异丙醇,待胶凝了之后用滤纸把异丙醇吸干净,不洗,再铺浓缩胶。我想问一下不洗可以么?要不要把异丙醇用去离子水洗洗呢?
2.我做的蛋白有的是胞膜蛋白,有的是胞浆蛋白,裂解的时候需要注意什么呢?具体的操作步骤是怎么样的呢?
3.我做的蛋白分子量是21kd,转膜条件大概应该是什么呢?我用的是150mA,1h,是不是太大了呢?
4.洗脱一抗和二抗的时候是用TBST洗三次么?我看有的资料上写的是TBST洗两遍,第三遍用TBS洗,哪种是对的呢?
5.我用的是DAB显色法,NC膜,请问NC膜可以重复利用么?怎么用stripping洗掉呢?
先谢谢楼主了,我暂时能想到的就只有这些