小中大
老师,我今天第1次做western blotting,以前从没做过。
问个菜鸟级别的问题。
在制作悬浮淋巴细胞的蛋白样本时。
我们已经测得3个管的细胞数:
control组(无药物):2.5×10^7.
A浓度药物组: 2.2×10^7.
B浓度药物组: 1.8×10^7.
这时我们另外用Tris Glycine SDS Sample Buffer(2×)+ 蒸馏水配制裂解缓冲液,放在另3个小管中。
control组(无药物):Tris Glycine SDS Sample Buffer(2×)250ul+ 蒸馏水 250ul(共500ul)
A浓度药物组: Tris Glycine SDS Sample Buffer(2×)220ul+ 蒸馏水 220ul(共440ul).
B浓度药物组: Tris Glycine SDS Sample Buffer(2×)180ul+ 蒸馏水 180ul(共360ul).
一个小问题,裂解缓冲液加多少量合适。
我看到文献都是加一样多的裂解缓冲液,那我是按照细胞多少加的,比如control组500ul;
A浓度药物组共440ul,B浓度药物组360ul.
可以嘛?