蛋白质与蛋白组学 » 讨论区 » 经验共享 » 【讨论帖】western blot问题解答

采购询价

点击提交代表您同意 《用户服务协议》 《隐私政策》

 6097  445/610 |‹‹‹443444445446447448449450451452›››|
 
需要登录并加入本群才可以回复和发新贴
打印 | 推荐 | 订阅 | 收藏

标题:【讨论帖】western blot问题解答

NBA[使用道具]
五级
Rank: 5Rank: 5


UID 75229
精华 6
积分 2497
帖子 4006
信誉分 114
可用分 20946
专家分 70
阅读权限 255
注册 2011-10-20
状态 离线
4441

发表于 2013-3-20 15:25 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
6%或者8%的分离胶marker跑不开就是marker的样品都是能出来十条左右的有颜色的条带，我每次用6%或8%的胶即使跑到最下面也都只能跑出来marker最上面的4个条带，改用10%的胶后，同样的条件，就能跑出来6个左右的marker条带。

==============================================

marker在6%或者8%的胶里面分子量小的是分不开的
请用小浓度的分离胶来做260KD的蛋白
顶部
NBA[使用道具]
五级
Rank: 5Rank: 5


UID 75229
精华 6
积分 2497
帖子 4006
信誉分 114
可用分 20946
专家分 70
阅读权限 255
注册 2011-10-20
状态 离线
4442

发表于 2013-3-20 15:26 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
这是什么蛋白？

=============

植物捕光蛋白
顶部
NBA[使用道具]
五级
Rank: 5Rank: 5


UID 75229
精华 6
积分 2497
帖子 4006
信誉分 114
可用分 20946
专家分 70
阅读权限 255
注册 2011-10-20
状态 离线
4443

发表于 2013-3-20 15:27 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
植物捕光蛋白

===================

蛋白表达量非常高啊
顶部
wmp1234[使用道具]
四级
Rank: 4


UID 79925
精华 0
积分 588
帖子 855
信誉分 100
可用分 5078
专家分 0
阅读权限 255
注册 2011-12-17
状态 离线
4444

发表于 2013-3-20 15:28 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
蛋白表达量非常高啊

=====================================================================================

何以见得？我另外一个蛋白，也是捕光蛋白，分子量略大，按照说明书，稀释7000倍，就不太好，很淡很淡。
顶部
NBA[使用道具]
五级
Rank: 5Rank: 5


UID 75229
精华 6
积分 2497
帖子 4006
信誉分 114
可用分 20946
专家分 70
阅读权限 255
注册 2011-10-20
状态 离线
4445

发表于 2013-3-20 15:29 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

看你的结果啊
蛋白条带很强
顶部
IAM007[使用道具]
三级
Rank: 3Rank: 3


UID 75217
精华 0
积分 464
帖子 608
信誉分 100
可用分 3861
专家分 0
阅读权限 255
注册 2011-10-20
状态 离线
4446

发表于 2013-3-20 15:29 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
我用的是百乐的凝胶成像系统拍照。
顶部
lixi559[使用道具]
四级
Rank: 4


UID 73492
精华 0
积分 560
帖子 820
信誉分 100
可用分 4896
专家分 0
阅读权限 255
注册 2011-9-23
状态 离线
4447

发表于 2013-3-20 15:46 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
老师：可不可以把你们做的RAC1的图片和RAC1的抗体说明书发给我看看嘛，我想换抗体了，换你们买得那家公司的吧，我看看你们买的跟我在网上查的一不一样。因为我看那个抗体说明书上说预测RAC1为21KD，但他图片上做出来的条带在26-36KD之间，我不知道是怎么回事！
顶部
lixi559[使用道具]
四级
Rank: 4


UID 73492
精华 0
积分 560
帖子 820
信誉分 100
可用分 4896
专家分 0
阅读权限 255
注册 2011-9-23
状态 离线
4448

发表于 2013-3-21 10:28 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

版主你好：我现在还在所RAC1，还是没有出结果，因为你以前也做过RAC1，所以能不能把你当时RAC1抗体说明书发给我参考参考，我想换你那个抗体用。
顶部
DONT[使用道具]
三级
Rank: 3Rank: 3


UID 73548
精华 0
积分 449
帖子 557
信誉分 100
可用分 3626
专家分 0
阅读权限 255
注册 2011-9-24
状态 离线
4449

发表于 2013-3-21 10:29 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
本科二年级的 小白明天要做个蔗糖酶的WB实验。。。老师没有给任何protocol，网上的也是说法不以……特来请教。
1.对于亚基60KD左右的蔗糖酶，电泳的电流电压条件应该怎么样设定？是恒流好还是恒压好。。具体电压、电流参数设定为多少？时间？是不是设定了恒压的话，电流就是会不断变化的？分离胶和浓缩胶中的电流和电压参数要分别设定的吗？
2、转膜的电压和电流参数？时间？
3、转膜液和电泳液的配方是？貌似这个网上很多版本啊。。。。
顶部
NBA[使用道具]
五级
Rank: 5Rank: 5


UID 75229
精华 6
积分 2497
帖子 4006
信誉分 114
可用分 20946
专家分 70
阅读权限 255
注册 2011-10-20
状态 离线
4450

发表于 2013-3-21 10:31 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
版主你好：我现在还在所RAC1，还是没有出结果，因为你以前也做过RAC1，所以能不能把你当时RAC1抗体说明书发给我参考参考，我想换你那个抗体用。

-----------------------------

05-389,Millipore
顶部
 6097  445/610 |‹‹‹443444445446447448449450451452›››|