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标题:【讨论帖】western blot问题解答

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发表于 2013-3-26 10:09 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
那这么说问题就出在了新换的一抗

=============================================

新换的抗体是ABCOM的
周围的人都说ABCOM的应该不会有问题的 弄得不自信了
哎 有没有可能我一抗的比例用的太高了
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发表于 2013-3-26 10:10 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
p/t-JNP和 p/t-MAPK都是巴傲德的
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发表于 2013-3-26 10:11 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
新换的抗体是ABCOM的
周围的人都说ABCOM的应该不会有问题的 弄得不自信了
哎 有没有可能我一抗的比例用的太高了

============================

Abcam公司的抗体也有效果不好的
不要迷信
我们经常投诉Abcam
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发表于 2013-3-26 10:11 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
p/t-JNP和 p/t-MAPK都是巴傲德的

===========

没有别的辙
换抗体吧
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发表于 2013-3-26 10:12 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

那国产抗体你能给推荐个吗？进口的买不起也等不起啊。。
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发表于 2013-3-26 10:12 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
楼主，本人原来都是用NC膜，这次用PVDF膜做actin发现有两条带，特异性也强，一条带与说明书上actin的大小更相近,较另一条带更细，哪一条才是目的条带呢？
用NC膜做相同的标本，试剂，就只有一条带，什么原因呢？
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发表于 2013-3-26 10:12 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
是样品中IgG重链非特异条带的可能性非常大

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那要怎么解决这个问题呢？求赐教！！
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发表于 2013-3-26 10:13 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
那国产抗体你能给推荐个吗？进口的买不起也等不起啊。。

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这个真没有
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发表于 2013-3-26 10:13 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
楼主，本人原来都是用NC膜，这次用PVDF膜做actin发现有两条带，特异性也强，一条带与说明书上actin的大小更相近,较另一条带更细，哪一条才是目的条带呢？
用NC膜做相同的标本，试剂，就只有一条带，什么原因呢？

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actin有两条带？
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发表于 2013-3-26 10:46 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
那要怎么解决这个问题呢？求赐教！！

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用与人IgG没有交叉的二抗（就是说用人IgG吸收后的二抗）
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