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我买的抗体（膜蛋白）是santa的，如果总蛋白在上样前煮沸的话就没有条带，但不煮的话就有条带，用的5*Buffer就是一般的，含有DDT的。santa说明书上说是此抗体可以做IP。今天试了一下，孵育一抗4度过夜，再加入protein G 孵育4度4h后离心后却没有看到沉淀。具体如下：
1.提取蛋白，方法就是一般的提蛋白 的方法
2.因本次只是预实验，没有蛋白定量，但总蛋白量大约有1mg
3.加入25ul（5ug抗体）抗体，于旋转摇床上4度过夜。
4.加入20ul protein G,于旋转摇床上4度,4h。
5.离心：于4度离心机，3000g/min,离心5min,没有看到沉淀，改为5000g/min,离心5min，还是没有看到沉淀。这是为什么呢？
