小中大请教老师做免疫共沉淀的问题，这个实验刚开始做，有些不明白的地方，我用的是BECN（santa. sc11427.60kd）沉淀蛋白，检测BCL-2的变化，我的实验步骤是
1. 细胞培养皿中的贴壁细胞，吸除细胞培养液，PBS洗涤一次，然后加入500微升至2毫升细胞裂解液裂解细胞。
2.取200微升至1毫升蛋白样品，蛋白量约200微克至1毫克，加20微升充分重悬的Protein A+G Agarose，4℃缓慢摇动30分钟至2h。
3.2500rpm(约1000g)离心5分钟，取上清用于后续的免疫沉淀。
4. 用BECN沉淀蛋白（BECN抗体为santa的货号为sc-11427，60kd）
C1.加入0.2-2微克用于免疫沉淀的一抗，4℃缓慢摇动过夜。
C2.再加入20微升充分重悬的Protein A+G Agarose，4℃缓慢摇动1个小时
C3.2500rpm(约1000g)离心5分钟，或瞬时高速离心，小心吸除上清，
C4.完成最后一次洗涤后，去除上清，加入20-40微升1XSDS-PAGE电泳上样缓冲液Vortex重悬沉淀，瞬时高速离心
C6.100℃或沸水浴处理3-5分钟，SDS-PAGE电泳，
5、转膜，封闭都按照做WB的要求，一抗孵育的是BCL-2(26KD),
左边的条带为沉淀后的蛋白 ，右边的是提取细胞上清 SDS-PAGE染色后
