梯度和等度的问题 - 分析百问

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标题:[已解决]梯度和等度的问题

[已解决]本主题悬赏可用分 10

aasle[使用道具]
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发表于 2009-9-4 19:12 资料个人空间短消息加为好友

小中大

等度的条件试了很多，不是不出峰，就是死时间出峰

=====================

从这两个结果看，在两者中间应该有个位置可以出峰的。

楼主慢慢摸索吧，流动相比例改动稍微小点

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miracle 2009-9-4 23:19 专家分 +2 欢迎您参与技术交流！

huihuidetian112[使用道具]
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发表于 2009-9-4 19:12 资料个人空间短消息加为好友

小中大

走梯度，峰出的怎么样?6min，有点短，能分开不？不加四氢呋喃看看，能不能出峰

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miracle 2009-9-4 23:20 专家分 +2 谢谢您的热心应助！

花火[使用道具]
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发表于 2009-9-4 21:49 资料个人空间短消息加为好友

小中大

建议楼主看看有关色谱分析方面的书籍。搞明白梯度洗脱的含义再说。你的实验过程就是证明了梯度的含义就是增强样品组分的洗脱能力。有些样品只能采用梯度洗脱的方式来增加分离度，以期得到较好的峰形，从而有较好的定量分析结果。

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miracle 2009-9-4 23:20 专家分 +3 thanks for the advice!

woaifou[使用道具]
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发表于 2009-9-4 21:58 资料个人空间短消息加为好友

小中大

在做等度洗脱的时候，平衡时间是否充分。如果标准品出两个峰，是否有一个是前一样品带入。你的进样器是手动还是自动的。
从梯度来看，其中肯定有一种比例是适合的，只是在等度的时候流动相对柱的平衡时间不够。

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miracle 2009-9-4 23:21 专家分 +3 thanks for your help!

aa_tang[使用道具]
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发表于 2009-9-5 12:09 资料个人空间短消息加为好友

小中大

多肽分析，确实经常遇到这样的问题。

从以往的经验看，乙腈比例的调整对分离有相当大的影响。挺敏感的，色谱保留行为，乙腈有时候微调1-2个百分点，分离有根本性的改变。

标准品出2个峰，一方面可能是色谱条件不合适引起的；另一方面是化合物本身不稳定，溶液状态变坏了。

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miracle 2009-9-5 16:17 专家分 +3 欢迎您参与技术讨论！

猴子[使用道具]
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发表于 2009-9-7 11:58 资料个人空间短消息加为好友

小中大

回复 #1 悠悠白云的帖子

你的试验只有你自己最清楚，谁也帮不了你。只要方法有效就行了，管他等度还是梯度呢？
寻找等度的方法是在能洗脱的前提下，一点一点减小流动相的洗脱能力，保留时间将会被逐渐延长。你找的方法到好，来个要么怎么样，要么怎么样，真不知道你是怎么摸索方法的，心里还有谱没？！

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miracle 2009-9-7 12:56 专家分 +3 谢谢您的帮助和支持

悠悠白云[使用道具]
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发表于 2009-9-7 16:26 资料个人空间短消息加为好友

小中大

回复 #15 猴子的帖子

你不帮就不帮吧，干嘛说这话？我心里要是有谱还来这求助干嘛？我做液相也不是一天两天了，怎么摸条件我还是知道的，如果像你想的那么简单，这项目早有人做出来了，还等我做呢？

ttkl533[使用道具]
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发表于 2009-9-8 15:40 资料个人空间短消息加为好友

小中大

你的问题很简单。

      你的等度洗脱没有问题，而是耐心有问题。也就是说的RUNTIME设置得太短了。原因如下：

      你第一针没有跑出色谱峰就停止了。这个就是你所说的“不出峰”，紧接着你又进了第二针，第一针没有看到的封跑到第

      二针的谱图上了，这就是你所说的“在死时间之前出峰”。


      改一改RUNTIME，看看我说的对不对。

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