TSQ质谱仪化合物条件优化标准操作规程

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标题:TSQ质谱仪化合物条件优化标准操作规程

dingdang[使用道具]
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发表于 2007-7-23 01:33 资料个人空间短消息加为好友

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某牛×大侠的著作：

一、优化待测化合物ESI质谱条件

1 样品导入方式的建立

1.1 选择适当长度的Peek管将两端通过接头分别与液相系统和切换阀2号口相连。
1.2 选择适当长度Teflon管将一端通过接头与切换阀1号口相连，并将另一端置于废液瓶中。
1.3 选择适当长度的Peek管将一端通过接头与切换阀3号口相连，另一端通过三通分别与离子源和样品转移毛细管相连。
1.4 将200 uL左右样品溶液吸入250 uL进样注射器中。
1.5 将进样注射器通过一个接头和一个二通与样品转移毛细管另一端相连。
1.6 按住注射泵黑色释放钮将注射泵手柄升高。
1.7 将进样注射器小心置于支架上并将注射泵手柄下移至进样注射器活塞柄顶端。

2. 质谱条件优化步骤

2.1 在Tune Master界面点击On/Standby激活质谱仪。
2.2 选择离子极性模式（正离子或负离子），如需进行正负离子切换，将将Spray Voltage调至0后操作。
2.3 进入Compound Optimization Workspace。
2.4 在Define Scan窗口选择Q1MS扫描模式和Full Scan扫描类型。
2.5 在Optimize Compound Dependent Devices窗口设置下列参数：
Spray Voltage设为3500 V
Sheath Gas Pressure设为30 arb
Aux Gas Pressure设为10 arb
Capillary Temperature设为350℃
Source CID设为0 V

2.6 激活注射泵以5 uL/min流速将进样注射器中的样品溶液导入质谱仪。
2.7 激活液相色谱泵选择适当流速将流动相导入质谱仪，观察到待测化合物的准分子离子峰峰强度在10的6次方左右，否则增大进样流速或选用浓度更高的待测化合物溶液（样品浓度一般建议1-10ug/mL,建议用甲醇或乙腈溶解）。
2.8 在Compound Optimization界面显示Single Sample窗口，选择MS Only优化模式和Syringe Pump Infusion入口类型选项。
2.9 优化Tube Lens Offset、Spray Voltage、Sheath Gas Pressure、Aux Gas Pressure和Source CID获得待测化合物稳定的准分子离子峰。
2.10记录并保存准分子离子质谱图。
2.11选择MS+MS/MS优化模式设置Parent Mass、Charge State和Num Product对子离子进行优化，优化前完成下列设置：
将Source CID设为0 V
将Collision Pressure设为1.5 mTorr
将Quad MS/MS Bias设为-1.0 V

2.12接受Collision Energy优化结果，并将Source CID设为优化值（由2.9得到）。
2.13记录并保存子离子全扫描质谱图。
2.14保存Tune Method文件。

3. 注意事项

3.1 待测化合物溶液浓度为1-10ug/mL
3.2 改变流动相比例和流速后应重新进行对Sheath Gas Pressure和Aux Gas Pressure进行优化
3.3 手动优化Capillary Temperature
3.4 点击Start开始自动优化程序，优化结束时点击Accept接受优化结果，或者点击Undo后再点击Accept保持优化前的仪器配置
3.5 仪器常用参数设置见下表。

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发表于 2007-7-23 01:35 资料个人空间短消息加为好友

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二、优化待测化合物APCI质谱条件

1. 样品导入方式的建立

1.1 选择适当长度的Peek管将两端通过接头分别与液相系统和切换阀2号口相连。
1.2 选择适当长度Teflon管将一端通过接头与切换阀1号口相连，并将另一端置于废液瓶中。
1.3 选择适当长度的Peek管将一端通过接头与切换阀3号口相连，另一端通过三通分别与离子源和样品转移毛细管相连。
1.4 将200uL左右样品溶液吸入250uL进样注射器中。
1.5 将进样注射器通过一个接头和一个二通与样品转移毛细管另一端相连。
1.6 按住注射泵黑色释放钮将注射泵手柄升高。
1.7 将进样注射器小心置于支架上并将注射泵手柄下移至进样注射器活塞柄顶端。

2. 质谱条件优化步骤

2.1 在Tune Master界面点击On/Standby激活质谱仪。
2.2 选择离子极性模式（正离子或负离子），如需进行正负离子切换，将Discharge Current调至0后操作。
2.3 进入Compound Optimization Workspace。
2.4 在Define Scan窗口选择Q1MS扫描模式和Full Scan扫描类型。
2.5 在Optimize Compound Dependent Devices窗口设置下列参数：
将Discharge Current设为4.0 Am
将APCI Vaporizer Temperature设为500℃
将Sheath Gas Pressure设为30 Arb
将Aux Gas Pressure设为10 Arb
将Capillary Temperature设为270℃
将Source CID设为0 V
2.6 激活注射泵以5uL/min流速将进样注射器中的样品溶液导入质谱仪。
2.7 激活液相色谱泵选择适当流速将流动相导入质谱仪，观察到待测化合物的准分子离子峰峰强度在10的6次方左右，否则增大进样流速或选用浓度更高的待测化合物溶液。
2.8 在Compound Optimization界面显示Single Sample窗口，选择MS Only优化模式和Syringe Pump Infusion入口类型选项。
2.9 优化Tube Lens Offset、Sheath Gas Pressure、Aux Gas Pressure和Source CID获得待测化合物稳定的准分子离子峰。
2.10记录并保存准分子离子质谱图。
2.11选择MS+MS/MS优化模式设置Parent Mass、Charge State和Num Product对子离子进行优化，优化前完成下列设置：
将Source CID设为0 V
将Collision Pressure设为1.5 mTorr
将Quad MS/MS Bias设为-1.0 V
2.12接受Collision Energy优化结果，并将Source CID设为优化值（由2.9得到）。
2.13记录并保存子离子全扫描质谱图。
2.14保存Tune Method文件。

3. 注意事项

3.1 待测化合物溶液浓度一般为1-10ug/mL。
3.2 改变流动相比例和流速后应重新进行对Sheath Gas Pressure和Aux Gas Pressure进行优化。
3.3 手动优化Capillary Temperature且不能高于270℃。
3.4 点击Start开始自动优化程序，优化结束时点击Accept接受优化结果，或者点击Undo后再点击Accept保持优化前的仪器配置
3.5 仪器常用参数设置见下表。