液相色谱

各位同仁，我最近在做一个化药含量的方法学研究，想请问一下大家，线性范围大概是多少？有什么样的规定没有(如50%-150%)？还有就是我是用液相（安捷伦1100）做的，我可不可以直接通过控制进样量（如10ul,15ul,20ul,25ul,30ul）来做线性而不是通过配制各个浓度的样品来做。
谢谢！

线性范围一般是在满量程的10%到90%，具体多少需要靠进样去验证。
控制进样量一般用定量环来，即使你是50uL的针，最小刻度达到1uL，进10uL两次相对误差最大能达到20%，进30uL也将近7%的相对误差呢，所以通过控制进样量来做除非是机械手自动进样，人的手恐怕达不到这么精准和重复！

80%-120%，不能通过控制进样量

80%-120%一般是回收率。线性要根据浓度和峰面积的比值绘制曲线图，求出R2。

药审中心：含量测定分析方法验证的可接受标准简介
2．线性
线性一般通过线性回归方程的形式来表示。具体的验证方法为：
在80％至120％的浓度范围内配制6份浓度不同的供试液，分别测定其主峰的面积，计算相应的含量。以含量为横坐标（X），峰面积为纵坐标（Y），进行线性回归分析。
可接受的标准为：回归线的相关系数（R）不得小于0.998，Y轴截距应在100％响应值的2％以内，响应因子的相对标准差应不大于2.0%。

不过这个范围有点窄，我一般做40%-140%
自己配制浓度，进样20μl，单位没有自动进样，你的那个问题就不回了

你直接控制进样量,能把相关系数R做得达到要求吗?

控制进样量应该可以达到R值的要求吧,我没试过,我只是觉得既然你的进样系统的定量是准确的,而又能设置它的进样量,并且做含量方法学时线性也是用来考察整个检测系统的.应该可以达到要求,只是不知道有没有人这么做过,不知道要是能做到符合要求的话,申报时会不会批下来.因为图谱上是会显示出进样量的

好问题，我也有类似的疑问，期待全面的解答

2005中国药典
六、线性
线性系指在设计的范围内，测试结果与试样中被测物浓度直接呈正比关系的程度。
应在规定的范围内测定线性关系。可用一贮备液经精密稀释，或分别精密称样，制备一系列供试样品
的方法进行测定，至少制备5份供试样品。以测得的响应信号作为被测物浓度的函数作图，观察是否呈
线性，再用最小二乘法进行线性回归。必要时，响应信号可经数学转换，再进行线性回归计算。
数据要求：应列出回归方程、相关系数和线性图。

没见过像你说的那样做标曲的，即使可以，请问样品进样量用多少

可以以进样量来做线性，只要最后R值能符合要求即可。