生物实验技术

(1)检验程序
(2)标本采集 可采集粪便、肛拭子及剩余食物，标本采集后应立即送检，或将标本接种于卡-布运送培养基中送检；对于高烧和患脑膜炎的病人，可于用药前抽取静脉血或脑脊液，注入布氏肉汤中送检。
(3)检验方法
1)显微镜检查 ①悬滴法动力检查：显微镜下观察有无螺旋状或投标样运动，脑脊液标本经离心沉淀后再制成悬滴标本检查；②染色标本检查：取新鲜粪便或脑脊液离心沉淀物涂片、革兰染色，查找革兰阴性、弯曲呈S状或螺旋状杆菌，鞭毛染色见一端或两端单根鞭毛；
2)分离培养 可将标本直接接种于选择性培养基上，也可将标本过滤后培养，弯曲菌形成的菌落为灰色、扁平、表面湿润、圆形凸起、边缘不规则，常沿穿刺线蔓延生长的菌落，在血平板上不溶血。本属细菌在布氏肉汤中呈均匀混浊生长。培养时需注意气体环境和适合的温度，空肠弯曲菌最适的温度为42℃～43℃，胎儿弯曲菌在42℃不生长。
3)鉴定 弯曲菌属的鉴定比较复杂，必须综合多种试验才能确定。通常在弯曲菌选择培养基上氧化酶阳性、革兰染色阴性、弯曲呈S形或螺旋形的细菌初步鉴定为弯曲菌，进一步的鉴定试验有：①马尿酸盐水解试验：本试验是鉴别空肠弯曲菌空肠亚种和多氏亚种的重要试验，在弯曲菌选择性培养基上经42℃孵育，氧化酶阳性、有特征性的弯曲菌形态、辅以马尿酸盐试验阳性即可报告为空肠弯曲菌空肠亚种；②醋酸吲哚水解试验：本试验空肠弯曲菌为阳性而胎儿弯曲菌为阴性；③萘啶酸、头孢噻吩耐药试验：空肠弯曲菌和大肠弯曲菌对萘啶酸敏感，对头孢噻吩耐药；胎儿弯曲菌对萘啶酸耐药而对头孢噻吩敏感。近来出现了对萘啶酸耐药的空肠弯曲菌和大肠弯曲菌，应结合马尿酸盐水解试验进行鉴定。
弯曲菌的其余鉴定试验有：不同温度的生长试验(25℃、37℃、42℃)、触酶试验、硝酸盐还原试验、产H2S试验等(见表13-1)。
(4)耐药性 由于弯曲菌感染大多呈轻症和自限性，一般不需特异性治疗。体外试验显示，绝大多数弯曲菌对头孢菌素和青霉素耐药，环丙沙星治疗弯曲菌感染非常有效，但近年来也出现了不少耐药菌株。空肠弯曲菌通常对红霉素敏感，其耐药率小于5％；而80％以上的大肠弯曲菌对红霉素耐药。胎儿弯曲菌引起的全身感染可用红霉素、氨苄西林、氨基糖苷类和氯霉素治疗。