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标题:[未解决]分析时主峰的中间分开了，出现了两个峰？

  [未解决]本主题悬赏 可用分 1  
michael_b_rex[使用道具]
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发表于 2009-10-12 13:46 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

分析时主峰的中间分开了，出现了两个峰？

做HPLC样品分析的时候， 用伊利特的柱子（4.6*250mm，5um）分析时主峰的中间分开了，出现了两个峰；用JAPAN柱的时候（4.6*150mm，5um）分析时
没有这种情况，就是把峰放大了有点拖尾，不过也可以看。
  这是怎么回事呀？  这两个柱子都是C18柱，就是长度不一样，为什么会有这种情况呢？？

  还有就是峰拖尾或是前沿对分析的结果有多大影响？？

  谢谢大家了，帮帮忙！！
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j-1982[使用道具]
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发表于 2009-10-13 16:44 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

回复 #1 michael_b_rex 的帖子

如果你确定应出单一的样品峰（不确定需通过“峰纯度”检验去判断），而柱使峰分叉了，就试着通过冲柱或补柱使柱效恢复。
拖尾会影响分离度及峰面积的准确测量，定量一般要求拖尾因子在0.95——1.05之间。
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  • miracle   2009-10-13 16:52  专家分  +3   谢谢您的热心解答！
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实验技术[使用道具]
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发表于 2009-10-13 17:30 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
这种情况很简单啊 无非就是你的柱子或者是检测器受到了污染，这峰有分叉和柱子长度没有关系的，建议你用乙腈（反相）或者合适的缓冲液冲洗。
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  • miracle   2009-10-13 17:51  专家分  +2   thanks for your help!
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JJSIE--NNE[使用道具]
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发表于 2009-10-13 17:32 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
完美状态下的峰是高斯正态分布曲线，因此，前沿和拖尾都会导致积分不准，严格的方法验证是有规定的，一般是拖尾因子在“0.8-1.2”之间。
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  • miracle   2009-10-13 17:51  专家分  +2   欢迎参与技术讨论！
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uwku58h[使用道具]
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发表于 2009-10-14 13:47 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
用不同品牌的柱子，分离度和分析结果肯定会有所不同的，要不怎么不同品牌柱子价格相差那么大。
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  • miracle   2009-10-14 14:54  专家分  +2   谢谢您的关注！
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ngoir[使用道具]
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发表于 2009-10-14 17:28 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
伊力特柱有问题,建议换一只,用不同柱可以判定正在用的柱是否有问题
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出国吧[使用道具]
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发表于 2009-10-15 13:34 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
也跟柱子的长度有关，因为柱子较长时，他的分离效率就会变大，在用JAPAN柱时，有拖尾，说明还是没有分开，建议用长一点的柱子做，在改变其流动相比例进行调节，看能不能分开。
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  • miracle   2009-10-15 15:54  专家分  +3   欢迎参与技术讨论！
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发表于 2009-10-15 14:13 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
你的柱子或者是检测器污染吧？
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amelican_beauty[使用道具]
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发表于 2009-10-15 15:22 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
建议改变流动相使出峰时间延后，看看是不是确实是两种极性相近的物质没有分开
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  • miracle   2009-10-15 15:55  专家分  +2   谢谢您的热心关注！
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