梯度洗脱，上下午保留时间相差很大？

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标题:[未解决]梯度洗脱，上下午保留时间相差很大？

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iTIANMING[使用道具]
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发表于 2009-10-14 14:45 资料个人空间短消息加为好友

小中大

利用Agilent1200分析匹莫苯丹，梯度洗脱，
流动相：A相：乙腈
B相：缓冲液(一定浓度磷酸二氢钾溶液，用磷酸调PH=2.5)
早上9：00样品主峰保留时间为9分钟，下午14：30保留时间居然为15分钟，
难道是缓冲液PH值发生变化造成所分析的物质保留时间的变化？但是以前保留时间很吻合啊！

j-1982[使用道具]
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发表于 2009-10-14 17:35 资料个人空间短消息加为好友

小中大

回复 #1 iTIANMING 的帖子

是一直做匹莫苯丹吗，然后保留时间慢慢发生了漂移？建议看看资料cuturl('http://www.antpedia.com/?uid-1753-action-viewspace-itemid-46584')
不到一天时间，缓冲液改变的可能性不大……先把柱子用纯乙腈冲十分钟，再换成大比例的纯水冲半小时，换成流动相初始比例平衡好后再进样看能不能恢复。

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miracle 2009-10-14 17:56 专家分 +4 谢谢您的详细帮助！

santa[使用道具]
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发表于 2009-10-15 11:37 资料个人空间短消息加为好友

小中大

洗脱程序是什么样的？

每次洗脱完，有没有用起始的相，稳定一段时间

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miracle 2009-10-15 11:50 专家分 +2 欢迎参与技术交流！

iTIANMING[使用道具]
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发表于 2009-10-15 14:29 资料个人空间短消息加为好友

小中大

谢谢1楼大侠帮助！！

回2楼，洗脱条件

T/min          A相：B相
0          15：85
6          20：80
20          80：20
20.1          15：85

每次分析完一个样品会用起始相稳定十几分钟啊！

JJSIE--NNE[使用道具]
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发表于 2009-10-15 17:42 资料个人空间短消息加为好友

小中大

缓冲盐的存在pH值变化应该不大啊。

室温有没有变化?他可以明显影响保留时间.但不会相差这么大

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miracle 2009-10-15 18:01 专家分 +2 欢迎参与技术讨论！

ttkl533[使用道具]
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发表于 2009-10-15 17:51 资料个人空间短消息加为好友

小中大

查查仪器的压力,可能是压力高了,压力高的原因可能是柱子脏了

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miracle 2009-10-15 18:01 专家分 +2 谢谢您的热心应助！

maicaixiaogu[使用道具]
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发表于 2009-10-16 11:42 资料个人空间短消息加为好友

小中大

从上午9分钟变到下午14分钟，是逐渐变还是突然？

如果是突然，有可能是有一个泵的流量有问题了

ph变化的可能很小，而且不存在有机相挥发问题

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miracle 2009-10-16 11:50 专家分 +3 欢迎参与技术讨论！

iTIANMING[使用道具]
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发表于 2009-10-16 13:52 资料个人空间短消息加为好友

小中大

有人建议用水、异丙醇冲洗缓冲液通道，若有磷酸盐留在通道会出现这种情形吗？想不明白啊！

从早上9：00到12：30保留时间都在9分多钟，中间用低流速平衡了一段时间，
2：00进一样品保留时间就变为13分钟了，以后每进一个样品保留时间都逐渐推后！

maomi530[使用道具]
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发表于 2009-10-16 14:32 资料个人空间短消息加为好友

小中大

你一直是用自动进样器的吗？自动进样器的进样程序改了没有？那个程序最后回到初始条件需要保留3-5min的。
还有个可能就是你的buffer需要重新配置后在试试，pbs很容易变质的。

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miracle 2009-10-16 15:38 专家分 +3 感谢您的详细帮助！

358uwcj[使用道具]
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发表于 2009-10-16 15:16 资料个人空间短消息加为好友

小中大

梯度洗脱完了要多平衡一会回到初始比例。然后在进样。平衡时间不够的原因吧。

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miracle 2009-10-16 15:38 专家分 +2 欢迎参与技术交流！

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标题:[未解决] function setanswer(pid){ if(confirm("您确认要把该回复选为“最佳答案”吗？")){ document.delpost.action='misc.php?action=bestanswer&tid=20635&pid=' + pid + '&bestanswersubmit=yes'; document.delpost.submit(); } } 梯度洗脱，上下午保留时间相差很大？

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