液相色谱

请教各位高手，我换了预柱后，出现新杂质？请分析！
波长：215nm，柱温40，柱子：Shodex RSpak DE-613.
流动相为：0.6g 3-羟甲基-氨基甲烷，0.82mL辛胺到900mL水中，用0.3M盐酸调pH至2.5，用水定容到1000mL。
样品溶剂就是流动相，但是换了预柱后，5min出现新的杂质。
还有就是空白溶剂峰中有杂质？4min和9min左右，为啥？

可以通过二极管阵列检测器对这两个色谱峰进行全波长扫描通过比较光谱图的方法来确定这两个峰究竟是不是同一物质。如果没有这样的检测器，可换几个波长分别测一下各自的相对面积含量，如果那个小峰是杂质，在不同的波长下会得出不一致的面积百分比含量。也可以通过进标样来判断究竟其是否为杂质。
如果排除杂质，造成这种现象的原因很有可能是保护柱没有平衡好（或其本身就存在问题），更换保护柱或对其进行清洗。

问题出在预柱上面，我今天换了一个新预柱。杂峰就不在了。
所以我总结是：预柱也能影响分离。