小中大包涵体的复性主要有两种方式:
1,稀释溶液,但是操作的液体量大,蛋白稀释
2,透析,超滤或电渗透析去除变性剂
其中透析很适合实验室应用,但是时间长。另外,如果蛋白质右两个以上的2硫键,很可能错误形成配对,应用还原剂。还有,复性的具体方法还要根据前期试验及筛选来确定!
另外,你用多大体积的透析缓冲液?可能不够,要更换几次
你家了多少蛋白呀 ?蛋白量过大也会使复性困难。
你用的透析代是否是新的,处理过没有?新代有化学杂质!
最后,有些复性过程就是还有沉淀(透析方法的缺点)看看溶液中蛋白含量,说不定已经够用了~~