制备液相色谱

用液相时遇到几个简单的问题不太清楚，请大家帮帮忙，谢谢！


1.查资料氨基柱的清洗要用5-10倍柱体积的含0.5- 1.0％NH3的50-50乙腈-水溶液冲洗，0.5- 1.0％是指体积百分数还是质量百分数呢？


2.拖尾峰的峰高比正常的峰高低吗？应该怎样积分，积半峰对吗？


3.氨基酸分析时，用的混标溶液含有18种氨基酸（氯化铵、天门冬氨酸Asp、谷氨酸Glu、丝氨酸Ser、甘氨酸Gly、组氨酸His、精氨酸Arg、苏氨酸Thr、丙氨酸Ala、脯氨酸Pro、酪氨酸Tyr、缬氨酸Val、蛋氨酸Met、异亮氨酸Ile、亮氨酸Leu、苯丙氨酸Phe、赖氨酸Lyb各2.5μmol/mL；胱氨酸Cys 1.25μmol/mL)，但只跑出17个峰，没有氯化铵的峰，氯化铵不属于胺类，添加在混标溶液中有什么作用呢？

1、体积比就行，用含NH3冲洗后要用不含NH3再冲至中性。
2、拖尾峰，只要符合系统适应性要求，按正常积分就行，不得积半峰，正途是找到拖尾的原因，解决它。
3、可能是缓冲盐作用或增加离子强度，氯化铵可能是人为检测需要而加入，不用检测它的含量，氯化铵在常规波长下没有吸收很正常。

1.  0.5- 1.0%是指体积百分数

2. 拖尾峰不是积半峰的，虽然峰形不好，还是要积全的。不过可以考虑该变流动相的配制方法，比如加入一点三乙胺，或许可以改善拖尾情况。

3  氯化铵不是氨基酸，是盐。所以可能和溶剂峰一起出来了。

氨基酸分析我不是很熟悉，以上是我的个人意见，希望有高人指点。

呵呵，谢谢楼上两位的详细帮助解答，一直都搞不清楚，现在总算明白了！