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标题:【讨论贴】关于共聚焦激光扫描显微镜的一切问题

mickeylin[使用道具]
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发表于 2013-4-11 15:07 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

很高兴看到这个帖子。我近期准备做T细胞与树突状细胞共培养实验，请问楼主有没有相关的protocol，谢谢！
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mickeylin[使用道具]
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发表于 2013-4-11 15:08 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

补允一下，我准备用荧光抗体标记，共聚焦检测。
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发表于 2013-4-11 15:08 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

这是我从站里复制的前辈的资料，希望对大家有用

【下载】激光共聚焦显微镜教程
cuturl('http://www.dxy.cn/bbs/post/view?bid=66&id=1278173&sty=3&keywords=%BC%A4%B9%E2%B9%B2%BE%DB%BD%B9%CF%D4%CE%A2%BE%B5')
【资源整理】激光共聚焦显微镜
cuturl('http://www.dxy.cn/bbs/actions/archive/post/1835142_0.html')
【求助】激光共聚焦显微镜检测AP-1的方法及具体过程!
cuturl('http://www.dxy.cn/bbs/post/view?bid=161&id=3307170&sty=3&keywords=%BC%A4%B9%E2%B9%B2%BE%DB%BD%B9%CF%D4%CE%A2%BE%B5')
【求助】激光共聚焦显微镜检测AP-1的方法及具体过程!
cuturl('http://www.dxy.cn/bbs/post/view?bid=41&id=3307172&sty=3&keywords=%BC%A4%B9%E2%B9%B2%BE%DB%BD%B9%CF%D4%CE%A2%BE%B5')
求助:Confocal(激光共聚焦显微镜） 检测软骨的活性
cuturl('http://www.dxy.cn/bbs/actions/archive/post/762748_0.html')
徕卡激光共聚焦显微镜软件教程中文翻译
cuturl('http://www.dxy.cn/bbs/actions/archive/post/419119_0.html')
请教用激光共聚焦显微镜
cuturl('http://www.dxy.cn/bbs/actions/archive/post/391646_0.html')
紧急求助：北京哪里有激光共聚焦显微镜？
cuturl('http://www.dxy.cn/bbs/actions/archive/post/865633_0.html')
求助：激光共聚焦显微镜
cuturl('http://www.dxy.cn/bbs/post/view?bid=110&id=2387383&sty=3&keywords=%BC%A4%B9%E2%B9%B2%BE%DB%BD%B9%CF%D4%CE%A2%BE%B5')
【互助小组】激光共聚焦显微镜讨论QQ群
cuturl('http://www.dxy.cn/bbs/post/view?bid=66&id=2712593&sty=3&keywords=%BC%A4%B9%E2%B9%B2%BE%DB%BD%B9%CF%D4%CE%A2%BE%B5')
【求助】如何制作激光共聚焦显微镜的组织切片
cuturl('http://www.dxy.cn/bbs/post/view?bid=66&id=2722422&sty=3&keywords=%BC%A4%B9%E2%B9%B2%BE%DB%BD%B9%CF%D4%CE%A2%BE%B5')
（请教）荧光显微镜和激光共聚焦显微镜的区别
cuturl('http://www.dxy.cn/bbs/actions/archive/post/1310428_0.html')
激光共聚焦显微镜培训讲稿
cuturl('http://www.dxy.cn/bbs/actions/archive/post/315139_0.html')
【求助】如何制作激光共聚焦显微镜的组织切片
cuturl('http://www.dxy.cn/bbs/post/view?bid=66&id=2716015&sty=3&keywords=%BC%A4%B9%E2%B9%B2%BE%DB%BD%B9%CF%D4%CE%A2%BE%B5')
关于购买激光共聚焦显微镜的建议
cuturl('http://www.dxy.cn/bbs/actions/archive/post/893811_0.html')
【讨论】激光共聚焦显微镜哪个品牌和性能最好？
cuturl('http://www.dxy.cn/bbs/post/view?bid=74&id=2807230&sty=3&keywords=%BC%A4%B9%E2%B9%B2%BE%DB%BD%B9%CF%D4%CE%A2%BE%B5')
建议讨论一下Confocal(激光共聚焦显微镜）
cuturl('http://www.dxy.cn/bbs/actions/archive/post/190732_0.html')
有朋友会用激光共聚焦显微镜吗？
cuturl('http://www.dxy.cn/bbs/actions/archive/post/391136_0.html')
请各位推荐激光共聚焦显微镜的资料
cuturl('http://www.dxy.cn/bbs/actions/archive/post/895095_0.html')
【5分下载】 Confocal Microscopy 英文教材(激光共聚焦显微镜)
cuturl('http://www.dxy.cn/bbs/actions/archive/post/1808786_0.html')
[申请上传] Confocal Microscopy 英文教材(激光共聚焦显微镜)
cuturl('http://www.dxy.cn/bbs/actions/archive/post/1789834_0.html')
Leica 激光共聚焦显微镜操作教程
cuturl('http://www.dxy.cn/bbs/actions/archive/post/1285910_0.html')
【下载】激光共聚焦显微镜教程
cuturl('http://www.dxy.cn/bbs/thread/1278173')
哪位大侠做过心肌细胞的激光共聚焦显微镜检查？
cuturl('http://www.dxy.cn/bbs/actions/archive/post/639931_0.html')
【总结】激光共聚焦显微镜资料汇总
cuturl('http://www.dxy.cn/bbs/post/view?bid=66&id=3311044&sty=3&keywords=%BC%A4%B9%E2%B9%B2%BE%DB%BD%B9%CF%D4%CE%A2%BE%B5')
激光共聚焦显微镜资料汇总
cuturl('http://www.dxy.cn/bbs/post/view?bid=41&id=3310800&sty=3&keywords=%BC%A4%B9%E2%B9%B2%BE%DB%BD%B9%CF%D4%CE%A2%BE%B5')
紧急求助：激光共聚焦显微镜的采图和数据分析方法
cuturl('http://www.dxy.cn/bbs/actions/archive/post/937405_0.html')
分享】蔡氏激光共聚焦显微镜网页介绍及相关小资料 cuturl('http://www.dxy.cn/bbs/post/view?bid=66&id=2448887&sty=3&keywords=%BC%A4%B9%E2%B9%B2%BE%DB%BD%B9%CF%D4%CE%A2%BE%B5')
10分可下载】德国Zeiss LSM 510激光共聚焦显微镜使用手册
cuturl('http://www.dxy.cn/bbs/post/view?bid=66&id=1933234&sty=3&keywords=%BC%A4%B9%E2%B9%B2%BE%DB%BD%B9%CF%D4%CE%A2%BE%B5')
【下载】Zeiss公司激光共聚焦显微镜原理及应用讲座(PPT)
cuturl('http://www.dxy.cn/bbs/post/view?bid=66&id=1877882&sty=3&keywords=%BC%A4%B9%E2%B9%B2%BE%DB%BD%B9%CF%D4%CE%A2%BE%B5')
【求助】激光共聚焦显微镜能作荧光共振能量转移吗？
cuturl('http://www.dxy.cn/bbs/post/view?bid=65&id=2767963&sty=3&keywords=%BC%A4%B9%E2%B9%B2%BE%DB%BD%B9%CF%D4%CE%A2%BE%B5')
【求助】激光共聚焦显微镜与全内反射显微镜在原理和应用上有什么区别？
cuturl('http://www.dxy.cn/bbs/post/view?bid=41&id=2767974&sty=3&keywords=%BC%A4%B9%E2%B9%B2%BE%DB%BD%B9%CF%D4%CE%A2%BE%B5')
[申请上传] Confocal Microscopy 英文教材(激光共聚焦显微镜) 需要的话帮忙顶！
cuturl('http://www.dxy.cn/bbs/actions/archive/post/1790009_0.html')
如何制备荧光标记细胞标本用于激光共聚焦显微镜？
cuturl('http://www.dxy.cn/bbs/actions/archive/post/892690_0.html')
流式和激光共聚焦测细胞内Ca2+各有何优点，费用怎样
cuturl('http://www.dxy.cn/bbs/actions/archive/post/637282_0.html')
【求助】线粒体膜电位
cuturl('http://www.dxy.cn/bbs/thread/2018689')
请教Fure-2测钙是怎么回事？急！谢谢
cuturl('http://www.dxy.cn/bbs/actions/archive/post/1730372_0.html')
请教细胞内ca2＋，camp和pkc的检测
cuturl('http://www.dxy.cn/bbs/actions/archive/post/440530_0.html')

请教细胞内钙离子流测定的方法
cuturl('http://www.dxy.cn/bbs/actions/archive/post/91490_0.html')

共聚焦显微镜能否取代病理科大夫？
cuturl('http://www.dxy.cn/bbs/thread/2379733')
急寻钙荧光探针fluo-3AM？ cuturl('http://www.dxy.cn/bbs/actions/archive/post/561528_0.html')
荧光显微镜下的多彩细胞世界----荧光染色探讨
cuturl('http://www.dxy.cn/bbs/actions/archive/post/184800_0.html')
求助：有关激光共聚焦象显微镜测量活细胞内钙火花测定
cuturl('http://www.dxy.cn/bbs/actions/archive/post/429627_0.html')
[求助]如何测定细胞内瞬间的钙离子浓度
cuturl('http://www.dxy.cn/bbs/thread/3175977')
（请教）几个概念
cuturl('http://www.dxy.cn/bbs/actions/archive/post/1601622_0.html')
关于激光共聚焦
cuturl('http://www.dxy.cn/bbs/post/view?bid=41&id=893777&sty=3&keywords=%BC%A4%B9%E2%B9%B2%BE%DB%BD%B9%CF%D4%CE%A2%BE%B5')
细胞自发荧光如何观察与拍摄？
cuturl('http://www.dxy.cn/bbs/actions/archive/post/256149_0.html')
【原创】免疫细胞荧光图象重叠：达到激光共聚焦效果
cuturl('http://www.dxy.cn/bbs/thread/3363424')
求助：关于细胞内钙离子浓度的测量还有一问 cuturl('http://www.dxy.cn/bbs/post/view?bid=74&id=3173418&sty=3&keywords=%BC%A4%B9%E2%B9%B2%BE%DB%BD%B9%CF%D4%CE%A2%BE%B5')
请教一个激光共聚焦试验的问题！谢谢！
cuturl('http://www.dxy.cn/bbs/actions/archive/post/1407558_0.html')
（请教）免疫荧光问题
cuturl('http://www.dxy.cn/bbs/actions/archive/post/1668565_0.html')
欢迎进入钙与细胞凋亡途径的讨论区
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求助）荧光染色
cuturl('http://www.dxy.cn/bbs/actions/archive/post/1043800_0.html')
（请教）用共聚焦观察免疫组化结果比一般光镜好狠多吗？
请问共聚焦显微镜的用途？
cuturl('http://www.dxy.cn/bbs/actions/archive/post/1696541_0.html')
激光扫描共聚焦显微镜的基本原理和主要生物学应用
cuturl('http://www.dxy.cn/bbs/actions/archive/post/557601_0.html')
请教：fura-2 和钙在细胞中的荧光发射峰谁看到过？
cuturl('http://www.dxy.cn/bbs/actions/archive/post/1743510_0.html')
免疫荧光组织化学技术
cuturl('http://www.dxy.cn/bbs/actions/archive/post/581276_0.html')
激光共聚焦扫描显微镜在生物学上的应用
cuturl('http://www.dxy.cn/bbs/actions/archive/post/1668567_0.html')
Re:（请教）关于激光共聚焦荧光双标的几个问题
cuturl('http://www.dxy.cn/bbs/actions/archive/post/1768868_0.html')
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发表于 2013-4-11 15:09 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

我打算用lscm测平滑肌细胞内钙离子浓度，定量，单纯比较两种平滑肌细胞的钙离子浓度差异有无统计学意义，看了一些文章觉得这个是不是有点大材小用了。
还有就是问一下专家，做出来的图片能不能对细胞内钙离子分布的区域差异做一分析那。
有谁做过类似的吗，可能提供一下步骤。
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发表于 2013-4-11 15:10 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
想知道一下：

1 研究大分子构象的改变时，怎么做荧光探针标记？
2 分辨率能不能达到 0.1 nm 级别？

谢谢！

=======================================================

光学显微镜分辨率受衍射极限限制，一般分辨率只有0.5-1微米。

即使近几年光学纳米显微成像技术的突破，也只能达到30-100纳米。

虽然有的报道能到达5纳米左右的分辨率，但许多限制条件不容易实现。
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发表于 2013-4-11 15:11 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
我想用荧光标记三个蛋白，共聚焦示踪，大家说能行得通吗？
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发表于 2013-4-11 15:11 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
我想用荧光标记三个蛋白，共聚焦示踪，大家说能行得通吗？

=======================================

当然可以，标记三个蛋白注意不要窜色就行。
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fei1226com[使用道具]
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发表于 2013-4-11 15:12 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
我打算用lscm测平滑肌细胞内钙离子浓度，定量，单纯比较两种平滑肌细胞的钙离子浓度差异有无统计学意义，看了一些文章觉得这个是不是有点大材小用了。
还有就是问一下专家，做出来的图片能不能对细胞内钙离子分布的区域差异做一分析那。
有谁做过类似的吗，可能提供一下步骤。

===============================================================================================================

您好，非常想请教您的问题：我的共聚焦显微镜对染料的要求有以下几种：fluo-3，fluo-3/fura red ,fluo-4,fluo-5N,fura red (ca -free).我也是想定量观察加药前后细胞内钙离子浓度的变化，不知道能不能选用Fura-2啊？请教您用的是哪个荧光染料啊？希望得到您的指点，非常非常感谢.
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qumm1985[使用道具]
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发表于 2013-4-11 15:12 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

楼主你好

想请教一下：为什么很多文章上confocal拍出的照片都是整块的色彩图片，而我拍的都是散点组成的图片？

特别是细胞核的蓝色，我看别人都是整个的，很完整。我每次拍都是一堆的散点组合。


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