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标题:【讨论帖】蛋白质PEG化修饰与纯化

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发表于 2013-4-18 13:21 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
这个~~~~还有纯化的过程，修饰上的PEG不会掉吗？原液纯化后条带就与PEG的分不开了~PEG残留这个有相关规定吗？

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一般情况下,修饰上PEG与蛋白是采用共价偶联,短时间应该稳定,否则做成药品时只能做成冻干纷针.况且如果脱落,更加应该在PEG化蛋白原液测定.
如果分子量20KD左右蛋白,修饰上一个PEG20Kd分子,SE-HPLC可以分开
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韩梅梅[使用道具]
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发表于 2013-4-18 13:21 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
PEG20000

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用凝胶色谱PEG20000应该和土温80可以分开的
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发表于 2013-4-18 13:22 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
用凝胶色谱PEG20000应该和土温80可以分开的

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是用ELSD?能介绍一下流动相吗？
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发表于 2013-4-18 13:22 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
一般情况下,修饰上PEG与蛋白是采用共价偶联,短时间应该稳定,否则做成药品时只能做成冻干纷针.况且如果脱落,更加应该在PEG化蛋白原液测定.
如果分子量20KD左右蛋白,修饰上一个PEG20Kd分子,SE-HPLC可以分开

==============================================================================================================

我们现在也在考虑这个问题~不过目前用的是健凯的PEG，不够理想~不知道是否因为PEG本身的问题~按道理分子量20KD左右蛋白,修饰上一个PEG20Kd分子电泳也应该可以分开阿~~~555~~~哭死~~~
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发表于 2013-4-18 13:23 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
我们现在也在考虑这个问题~不过目前用的是健凯的PEG，不够理想~不知道是否因为PEG本身的问题~按道理分子量20KD左右蛋白,修饰上一个PEG20Kd分子电泳也应该可以分开阿~~~555~~~哭死~~~

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可以试验一下凯正修饰剂,如果有什么问题,我们公司可以帮你解决
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发表于 2013-4-18 13:23 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
是用ELSD?能介绍一下流动相吗？

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ELSD可选择醋酸铵等可挥发流动相
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发表于 2013-4-18 13:24 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
ELSD可选择醋酸铵等可挥发流动相

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请问您做过PEG修饰蛋白后样品里游离PEG的检测吗？用的是什么流动相？什么色谱柱？ELSD对于流动相的选择除了不能含盐还有别的吗？我真的急需这方面的信息~~~多谢~~~
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发表于 2013-4-18 13:24 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
我的peg-丁醛是在贵公司买的，修饰率还不错，我想请教一下，您说的(3)PEG分子量标准,PEG染色,SDS-PAGE，在哪里能买到？
.
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发表于 2013-4-18 13:25 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
昨天过凝胶柱结果蛋白全挂柱子上了，郁闷！！各位大虾！！修饰后的蛋白过凝胶柱是不是经常会全挂在柱子上洗不下来？
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zranqi_1[使用道具]
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发表于 2013-4-18 13:25 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
我的peg-丁醛是在贵公司买的，修饰率还不错，但会有多点修饰，我想请教一下，您说的(3)PEG分子量标准,PEG染色,SDS-PAGE，在哪里能买到？
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