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标题:【讨论帖】蛋白质PEG化修饰与纯化

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发表于 2013-4-18 12:48 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
如果大家都这么感兴趣，我可以建个关于PEG修饰的群，大家在群里尽情讨论怎么样？
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发表于 2013-4-18 12:48 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

我认为比较经典的文献的有
Introduction and overview of peptide and protein pegylation
PEGylation, successful approach to drug delivery
Beyond PEGylation
Peptide and protein PEGylation a review of problems and solutions
Chemistry for peptide and protein PEGylation
刚开始接触这行，看看这几篇就有整体了解和把握了
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发表于 2013-4-18 12:49 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
我打算做pal酶的PEG修饰，现在刚刚开始查资料。大家能不能给小弟介绍几篇比较经典的文章。

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推荐一本书
polyethylene glycol chemistry and biological application是J.M.harris编写1997年版
还有个更早的版本
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发表于 2013-4-18 12:49 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
如果大家都这么感兴趣，我可以建个关于PEG修饰的群，大家在群里尽情讨论怎么样？

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是个不错的建议。不过有个PEG群，里面也有些做PEG修饰的朋友，只是很少有人讨论PEG修饰技术
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韩梅梅[使用道具]
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发表于 2013-4-18 12:50 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
你好！我是北京凯正生物研发负责人，主要从事PEG修饰剂研究开发，希望你的朋友用的是我们修饰剂。

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我只是把以前了解的一些内容拿出来和大家讨论，popo兄才是这方面的专家呀，相信jfyan兄对很多蛋白PEG修饰都有所研究，如果不涉及商业秘密的话，希望jfyan兄能讲解PEG修饰最新进展
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发表于 2013-4-18 12:50 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
推荐一本书
polyethylene glycol chemistry and biological application是J.M.harris编写1997年版
还有个更早的版本

Introduction and overview of peptide and protein pegylation
PEGylation, successful approach to drug delivery
Beyond PEGylation
Peptide and protein PEGylation a review of problems and solutions
Chemistry for peptide and protein PEGylation
刚开始接触这行，看看这几篇就有整体了解和把握了

不知道这几位兄台能上传到这里么??很想看看
发到邮箱可以么??

如果大家都这么感兴趣，我可以建个关于PEG修饰的群，大家在群里尽情讨论怎么样？
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发表于 2013-4-18 12:51 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
DEAE纯化PEG修饰A图谱，你的图谱是不是和这张有点像

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用mPEG－SPA修饰，游离的修饰剂不在穿透峰中，可能混在你的peg－protein中，所以一般用SP柱子较好，否则还要除掉游离PEG
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fsdd817[使用道具]
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发表于 2013-4-18 12:52 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
您好！不知您用的凯正修饰剂哪个方面觉得比进口的差？希望看到您的宝贵意见，我们会继续提高PEG修饰剂质量

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我有一个问题想问下严先生:
不知道是我个人现象还是都这样
我用LOWRY测蛋白浓度是一加试剂就出现一种绿色的絮状沉淀
你们的客户有没有向你们反映过这种情况??
还有 在最后怎么/用什么方法确定MPEG的残留及含量??
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发表于 2013-4-18 12:52 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
我有一个问题想问下严先生:
不知道是我个人现象还是都这样
我用LOWRY测蛋白浓度是一加试剂就出现一种绿色的絮状沉淀
你们的客户有没有向你们反映过这种情况??
还有 在最后怎么/用什么方法确定MPEG的残留及含量??

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目前还没有客户反映，因为我们蛋白浓度采用280nm测定，由于PEGylation并不影响蛋白质uv吸收，所以用uv280测定peg－protein应该是准确的。
mPEG残留目前一般采用测定是HPLC－ELSD，也就是液相色谱蒸发光散射检测，hplc也可以是SE－HPLC，因为修饰蛋白和游离PEG在GF250或TSK3000pwxl等柱上可以分开，如果目前没有ELSD检测，用示差检测也可以就是灵敏度低一些
另外关于lowry法测蛋白浓度，不知您是否使用过我们修饰剂，不过我们会试一下，到时结果通报大家
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发表于 2013-4-18 12:53 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
我有一个问题想问下严先生:
不知道是我个人现象还是都这样
我用LOWRY测蛋白浓度是一加试剂就出现一种绿色的絮状沉淀
你们的客户有没有向你们反映过这种情况??
还有 在最后怎么/用什么方法确定MPEG的残留及含量??

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你说的沉淀我个人感觉就像是氢氧化铜的沉淀，理论上讲PEG修饰不会影响肽键，当然也就不会影响Cu络合物形成，不知道您使用的是哪种修饰剂？
确定已经分离纯化得到PEG－Protein？还有没有其他？
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