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标题:【讨论帖】蛋白质PEG化修饰与纯化

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发表于 2013-4-18 12:54 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

氢氧化铜应该是蓝色絮状沉淀
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发表于 2013-4-18 12:54 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
推荐一本书
polyethylene glycol chemistry and biological application是J.M.harris编写1997年版
还有个更早的版本

Introduction and overview of peptide and protein pegylation
PEGylation, successful approach to drug delivery
Beyond PEGylation
Peptide and protein PEGylation a review of problems and solutions
Chemistry for peptide and protein PEGylation
刚开始接触这行，看看这几篇就有整体了解和把握了

不知道这几位兄台能上传到这里么??很想看看
发到邮箱可以么??

如果大家都这么感兴趣，我可以建个关于PEG修饰的群，大家在群里尽情讨论怎么样？

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nektar的catlogue，不过里面有很多关于修饰剂以及pEGylation和罗列一些参考文献
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发表于 2013-4-18 12:55 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

不知各位有没有用mPEG－MAL特异性修饰蛋白质半胱氨酸的，遇到的问题经验大家讨论一下
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韩梅梅[使用道具]
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发表于 2013-4-18 12:55 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

我们实验室曾经通过基因工程方法在蛋白N端接了一个半胱氨酸，采用mPEG-Mal20000修饰，没有成功，可能原因是N端Cys被降解，我们在SDS-PAGE非还原条件下发现二聚体的踪迹，但量太少。jfyan兄有什么高见
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发表于 2013-4-18 12:55 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大


QUOTE:
原帖由 韩梅梅 于 2013-4-18 12:55 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '%s')

我们实验室曾经通过基因工程方法在蛋白N端接了一个半胱氨酸，采用mPEG-Mal20000修饰，没有成功，可能原因是N端Cys被降解，我们在SDS-PAGE非还原条件下发现二聚体的踪迹，但量太少。jfyan兄有什么高见 ...

最近客户询问mPEG－MAL修饰后，产物不太稳定，大概几个小时PEG就脱落，国内国外修饰剂都是一样。
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发表于 2013-4-18 12:56 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

cysteine与mal形成硫醚键比较稳定，一般亚胺键在碱性条件下易水解。目前我们准备用N－乙酰基半胱氨酸研究一下，我想知道是不是大家都发现这种现象？
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发表于 2013-4-18 12:56 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
我们实验室曾经通过基因工程方法在蛋白N端接了一个半胱氨酸，采用mPEG-Mal20000修饰，没有成功，可能原因是N端Cys被降解，我们在SDS-PAGE非还原条件下发现二聚体的踪迹，但量太少。jfyan兄有什么高见

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如果是在N末端引入，直接N端测序不就知道cys是否还在？因为mPEG－MAL与cys反应还是比较容易，一般室温1～2各小时就反应完全，所以上不去的原因应该是cys降解掉了
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duoduo[使用道具]
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发表于 2013-4-18 12:57 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

现在要买peg了，在丁香园上看到三个公司。不知道那个好些，在此请教各位大侠：
凯正，健凯，海格里斯的peg那个相对会更好用些？

谢谢！！！！
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发表于 2013-4-18 12:57 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
你自己要好好判断啊！有的公司目录整个就是翻译的nektar目录。凯正和键凯有相同产品，也有不同的，最好你都买一些，做个比较。
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jkobn[使用道具]
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发表于 2013-4-18 12:58 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
你的问题非常好
1：以前用得都是Nektar的，现在国产的也有了，效果也还可以，国内的厂家你可以在DXY查查

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您好，您能给出购买mPEG（Mw10kda与20kda）的具体信息吗？？现在nektar好像不卖了，多谢，在线等。
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