小中大
我这两天又看了一点资料
谈一点关于质粒丢失的心得:
对于amp抗性来说,在培养基大约开始浑浊的时候,amp就已经开始分解了。当OD600值到达0.6的时候，amp抗性就已经分解的差不多了，再往后没有携带质粒的菌生长就开始占优势了。
按照pRSET说明书的说法，在cam和amp中培养过夜，就可以防止质粒丢失，也就不需要按照pET mannul所说的，譬如摇菌到0.4~0.6，4度保存过夜，第二天早晨离心弃上清，再加新鲜培养基稀释，接种。
针对（It is not neccessary to include antibiotics for expression）这句话，如果cam可以保证转化的质粒的量的话，那么在诱导的时候，一般我们都是将菌摇到0.6开始加入IPTG的，如果接种的菌液都可以保证最大比例的质粒含量的话，在OD0.6之前，就不存在amp分解造成杂菌生长的问题了。
这是我个人的理解，不太确定。希望得到讨论。
