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标题:[未解决]DTT会连在巯基上吗

  [未解决]本主题悬赏 可用分 10  
紫菁[使用道具]
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DTT会连在巯基上吗

我的包涵体溶在8M脲中,然后加DTT还原,然后质谱,发现加DTT的比不加DTT的质荷比要多100左右,这是为什么呢?DTT会连在游离巯基上吗?
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358uwcj[使用道具]
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8M脲能直接质谱吗?
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回复 #1 紫菁 的帖子

应该不会连的。。你用的是什么质谱啊。。。用飞行时间质谱就完全不会出现这种情况。。你可加半胱氨酸试试。。
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  • miracle   2009-11-28 16:59  专家分  +3   欢迎参与技术讨论!
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nihao123[使用道具]
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没遇到过这样的情况哎,应该不会连吧
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紫菁[使用道具]
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我用的就是MALDI-TOF啊,做了几次都比未加DTT的大。不知啥原因,请高手指教!
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ncba[使用道具]
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在还原的过程中, DTT有可能加和在蛋白上, 反应时间足够长之后, DTT的加合物会消失。
可参考  用电喷雾质谱法监测重组人肿瘤坏死因子(rhTNF)中二硫键的还原过程,分析测试学报,1999,18(3):56-58.
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dumiao123[使用道具]
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不会的,是你的二流键打开,与其他东西反应了,也就是你打开的二流键被修饰了,
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