蛋白质与蛋白组学

知道你要做什么就好更有针对性的帮你了。
1）前提：这30个蛋白你手里应该已经有了。
2）临床检测有2种，一种是血清学指标，一种是组织形态学指标，因此请首先做预实验确认这点，如果兼或有之，对一个博后课题而言，选择其一进行即可，不可能面面俱到。
3）如果是血清学检测，则选择蛋白芯片较好。
4）如果是形态学观察，可以用组织芯片。
5）无论使用哪种芯片，都需要得到这30个蛋白的抗体，按照你文中的经费是不太够用，对那些有商品化的，尽量选择小包装抗体，全新蛋白，建议你还是放弃吧，否则制备抗体投入太大，即使做多抗也需要2－3个月，还需要K以上经费。
6）得到抗体后，做蛋白芯片其实很简单，自己在PVDF等膜上点样即可，成本很低。
7）至于检测芯片倒是有可能在你课题进行当中获得启示和灵感。
8）组织芯片是个很好的工具，的确可以大大减少劳动强度。

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请教目前蛋白芯片技术的发展, 国际上到了怎样一个水平. 拒我看的一些文献, 目前提的最多的是抗体的来源问题,另外,在自己构建蛋白芯片过程中, 可重复性、敏感性、检测范围、定量能力等都是需要解决的问题。而商业化的蛋白芯片主要集中在细胞因子检测，包括夹心免疫分析和直接标记法，似乎这种技术已经较为成熟了，但应用这些产品的文章目前并不是很多，更多的文章是关于技术的改进、各种检测方法、载体的比较等等。

请教各位高手，最近我做蛋白芯片的时候发现抗体很难在深圳赛尔公司的琼脂糖芯片上固定，我用的固定方法是：抗体包被液为PH9.6的碳酸盐缓冲溶液＋30％的灭菌甘油，在湿盒中4度冰箱过夜，我做过24h和48h的包被，但抗体依然上不去，究竟出了什么原因？怎么判断抗体已经固定上去了？或者有没有更好的固定方法，请各位高手赐教！
后面漂洗的时候我都是很温柔的漂洗，不可能是把抗体冲掉的啊。我用鼠的单抗固定，然后用抗鼠的二抗去检测，但检测不到，所以我觉得应该是抗体没固定好。

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1）使用中性缓冲液，如PBS固定。
2）判断抗体是否固定，可以在固定液中加入带荧光物质，固定清洗后直接扫描。

请教目前蛋白芯片技术的发展, 国际上到了怎样一个水平. 拒我看的一些文献, 目前提的最多的是抗体的来源问题,另外,在自己构建蛋白芯片过程中, 可重复性、敏感性、检测范围、定量能力等都是需要解决的问题。而商业化的蛋白芯片主要集中在细胞因子检测，包括夹心免疫分析和直接标记法，似乎这种技术已经较为成熟了，但应用这些产品的文章目前并不是很多，更多的文章是关于技术的改进、各种检测方法、载体的比较等等。

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要点实际上你自己都已经回答了。补充一条，对美国和欧洲一些国家而言，科研的发展虽然容许灵活，但面对医学诊断和有生命的人体，则审批程序严苛许多。