蛋白质与蛋白组学 » 讨论区 » 经验共享 » 【讨论帖】western 内参选择

采购询价

点击提交代表您同意 《用户服务协议》 《隐私政策》

 
需要登录并加入本群才可以回复和发新贴

标题:【讨论帖】western 内参选择

mickeylin[使用道具]
三级
Rank: 3Rank: 3


UID 79369
精华 0
积分 461
帖子 582
信誉分 100
可用分 3756
专家分 0
阅读权限 255
注册 2011-12-10
状态 离线
41
 

好贴啊!!!感谢大家指点。
我还有个问题,我看大家说的用β-actin等内参都是用于动物组织。那么做毕赤酵母western时用什么内参比较好啊??我查了好长时间都没有查出来。
顶部
33号[使用道具]
四级
Rank: 4


UID 74277
精华 0
积分 549
帖子 757
信誉分 100
可用分 4611
专家分 0
阅读权限 255
注册 2011-10-9
状态 离线
42
 

补充一点选内参的原则:所选的内参与目的基因之间不能有调节关系,否则内参就不客观了,如:你是做与糖代谢相关的基因就不能选GAPDH,与细胞骨架相关的就不能选β-actin。
顶部
cj_mondy[使用道具]
四级
Rank: 4


UID 76095
精华 0
积分 627
帖子 853
信誉分 100
可用分 5201
专家分 0
阅读权限 255
注册 2011-11-1
状态 离线
43
 

我是做大鼠心肌细胞线粒体和胞浆内的蛋白,目的蛋白已经作出来了
内参作了B-actin,没有作出条带,怀疑是心肌细胞本来就没有B-actin,
后换GAPDH,结果还是没有条带.
GAPDH是用的北京博奥森公司的小鼠单抗
真的是郁闷了
据网上同志们作的实验,DAPDH在心肌细胞里是有表达的
现在的问题是
1分别提取线粒体和胞浆蛋白后,是不是就剔除了GAPDH,所以没有表达?
2 北京博奥森公司的GAPDH小鼠单抗 是不是真的不行?
顶部
kewanqi2011[使用道具]
四级
Rank: 4


UID 76114
精华 2
积分 534
帖子 660
信誉分 104
可用分 4146
专家分 20
阅读权限 255
注册 2011-11-1
状态 离线
44
 

水稻根一般选的内参是什么啊
还没做过
谢谢
顶部
33号[使用道具]
四级
Rank: 4


UID 74277
精华 0
积分 549
帖子 757
信誉分 100
可用分 4611
专家分 0
阅读权限 255
注册 2011-10-9
状态 离线
45
 

做毕赤酵母western时用什么内参比较好啊??我查了好长时间都没有查出来。

还请大家指点!!!谢谢!!!
顶部
天蝎座[使用道具]
三级
Rank: 3Rank: 3


UID 76216
精华 1
积分 204
帖子 104
信誉分 102
可用分 1296
专家分 10
阅读权限 255
注册 2011-11-2
状态 离线
46
 

线粒体蛋白一般用什么内参?
顶部
脱水萝卜[使用道具]
三级
Rank: 3Rank: 3


UID 74065
精华 0
积分 152
帖子 63
信誉分 100
可用分 1031
专家分 0
阅读权限 255
注册 2011-10-4
状态 离线
47
 
我用的内参是GAPDH
顶部
zhenxin[使用道具]
四级
Rank: 4


UID 76024
精华 0
积分 748
帖子 1216
信誉分 100
可用分 6848
专家分 0
阅读权限 255
注册 2011-10-31
状态 离线
48
 

我也准备做western blot,我的测试蛋白大概在40kd,选GADPH还是beta-actin作内参好点呢?最好是内参和一抗分开孵育吧?
顶部
987789[使用道具]
三级
Rank: 3Rank: 3


UID 75248
精华 0
积分 479
帖子 598
信誉分 100
可用分 3870
专家分 0
阅读权限 255
注册 2011-10-20
状态 离线
49
 

做毕赤酵母western时用什么内参比较好啊??我查了好长时间都没有查出来。

还请大家指点!!!谢谢!!!
顶部
987789[使用道具]
三级
Rank: 3Rank: 3


UID 75248
精华 0
积分 479
帖子 598
信誉分 100
可用分 3870
专家分 0
阅读权限 255
注册 2011-10-20
状态 离线
50
 

请问提取的酵母总蛋白怎样保存比较好??!!!急!!!
顶部