小中大我来说点不同看法
内参是western中重要的一步,但是是不是每次都要做,答案显然是否定的.只有在需要得到可发表的结果的情况下,才有必要做一个漂亮的内参.
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这么肯定的将内参的作用局限在“需要得到可发表的结果的情况下”的狭小范围内,似乎有些不妥。科研过程中,有谁能未卜先知到实验结果?没有内参的作用,我们如何得知得到的结果就是“可发表的结果”?
1: western本身就是一个很粗略的定量方法,严格的说,根本不具有定量的能力,所有从werster里出来的表达量的区别(明显的“有”“没有”的区别属于定性),都是不精确的,苛刻点说,压根就是不可采信的。所以内参只是一个为了结果完整性而出现的东西,平时做western如果次次做内参,完全没有必要,也没什么太大帮助
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western的确是一种半定量的方式,不是很精确,但这决不是因噎废食甚至是“破罐子破摔”的理由。内参的出现,就是为了在一定程度上弥补WB的不足而必须的一种实验设计,只有这样我们才有可能对每次的WB结果进行分析。请注意,内参不是完整性结果的“果”或“附属品”,而是“因”或“前提”,颠倒了两者的关系,可不是一种科学严谨的实验态度哦。
当然,如果是同一批样品,在保证上样体积一致的情况下,是可以不必次次做内参的。