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标题:[未解决]RAW264.7的消化(SOS)

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xiaguangkai[使用道具]
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发表于 2013-4-23 16:37 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

RAW264.7的消化(SOS)

这几天正在样这个巨噬细胞株，实在是被他给打败了。生长还好，就是消化特难。
每次我都是用%0.25的胰酶加EDTA37℃消化5分钟，一点效果都没有，然后拍打之后再消化5分钟才会有细胞脱落，而且是一大片一大片的，然后离心传代。 这样细胞也会死很多，而且 培养瓶里有些贴壁比较牢固的细胞依然坚挺，这样就会生长得不均匀，细胞状态也会变差。我用的是25cm2的培养瓶，DMEM高糖+10%FBS。 用枪头吹打。
所以希望各位前辈们能指点小弟。
小弟在此谢过了！

winter is coming！
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pigder[使用道具]
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发表于 2013-6-8 11:29 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

建议用细胞刮

ATCC上建议用细胞刮，对细胞伤害较小。
    我一般用胰酶消化后直接吹打，也可以用枪头轻轻来回刮，但对细胞伤害挺大。
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pigder[使用道具]
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发表于 2013-6-8 11:31 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

建议用细胞刮

ATCC上建议用细胞刮，对细胞伤害较小。
    我一般用胰酶消化后直接吹打，也可以用枪头轻轻来回刮，但对细胞伤害挺大。
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