蛋白质与蛋白组学 » 讨论区 » 经验共享 » 【讨论帖】蛋白芯片技术答疑帖

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标题:【讨论帖】蛋白芯片技术答疑帖

junjie05[使用道具]
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发表于 2013-4-24 17:38 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

请介绍下帅选akt与mapk通路方面比较好的蛋白芯片，由于标本受限，做不了wb，是否蛋白芯片筛出了相关的信号蛋白就可以了呢？
另补充问一个问题，如果用PCR帅选信号通路的分子是否可以呢？如果PCR的结果是阴性的，磷酸化的蛋白不表达，是否就可以认为蛋白最终没有表达呢？
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dragonkilly[使用道具]
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发表于 2013-4-25 11:27 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大


QUOTE:
原帖由 junjie05 于 2013-4-24 17:38 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '%s')

请介绍下帅选akt与mapk通路方面比较好的蛋白芯片，由于标本受限，做不了wb，是否蛋白芯片筛出了相关的信号蛋白就可以了呢？
另补充问一个问题，如果用PCR帅选信号通路的分子是否可以呢？如果PCR的结果是阴性的，磷酸化的蛋白不表 ...

筛选AKT与MAPK通路有专门对应的通路芯片，具体包括的抗体信息我放在附件中了，供查阅！

正如楼上所说的，抗体芯片最大的优点在于通量高，可以同时针对多个位点进行检测，节约样品用量。

芯片检测后，您只需要对筛出的有兴趣位点进行WB验证就可以了。

PCR信号通路芯片毕竟是检测的mRNA水平的变化，而磷酸化是蛋白的一种修饰方式，我认为PCR芯片是可以检测表达水平，但无法完全代表该位点的磷酸化水平变化。
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发表于 2013-4-25 13:20 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

用 自己纯化的兔多抗制备蛋白质芯片，如何保证芯片质量？
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glass[使用道具]
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发表于 2013-4-25 13:21 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

有用金作为基底的吗？
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viviwang1987[使用道具]
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发表于 2013-4-25 13:21 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

楼主您好！

想咨询下Raybiotech细胞因子芯片这种半定量的蛋白芯片，你们在国内都有哪些客户，发表过那些文章呢？
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发表于 2013-4-25 13:22 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
用 自己纯化的兔多抗制备蛋白质芯片，如何保证芯片质量？

============================================================================================================

芯片质量主要还是依靠抗体的特异性与亲和力，所以无论是兔多抗还是鼠单抗，在上芯片前，总是要进行大量的预实验，进行相关验证与评价。
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dragonkilly[使用道具]
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发表于 2013-4-25 13:22 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
楼主您好！

想咨询下Raybiotech细胞因子芯片这种半定量的蛋白芯片，你们在国内都有哪些客户，发表过那些文章呢？

===============================================================================================================

RayBiotech的芯片国内现在的用户也很多了，最近几年也陆续有文章发表的。其实对于发表文章来说，关键的不是用了哪种芯片，而是芯片的结果能对我们的文章提供多少帮助。我想您如果在犹豫使用芯片的手段检测细胞因子是否可靠，我认为这个不必担心，无论是RayBiotech的体系，或者其他的一些multi的方法，例如Bio-Plex，在细胞因子检测上都比较成熟。
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发表于 2013-4-25 13:23 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

蛋白芯片技术的基本原理是将各种蛋白质有序地固定于滴定板、滤膜和载玻片等各种载体上成为检测用的芯片，然后，用标记了特定荧光抗菌素体的蛋白质或其他成分与芯片作用，经漂将未能与芯片上的蛋白质互补结合的成分洗去，再利用荧光扫描仪或激光共聚焦扫描技术，测定芯片上各点的荧光强度，通过荧光强度分析蛋白质与蛋白质之间相互作用的关系，由此达到测定各种蛋白质功能的目的。
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eric930[使用道具]
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发表于 2013-4-25 13:24 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

请问国内现在有公司做反相蛋白芯片吗，价钱贵吗，谢谢，另外细胞因子芯片是不是就是抗体芯片的一种
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cocacola[使用道具]
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发表于 2013-4-25 13:24 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

你是要购买反相蛋白芯片还是要定制反相蛋白芯片呢？这个其实和组织芯片是一个道理，要看你想要研究的对象是什么，要根据自己的研究方案来选择和确定的。如果有问题的话还是可以继续联系的。
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