蛋白质与蛋白组学

通常去除内毒素的方法大多是过离子交换柱或者用萃取的方法,当然也有用亲和柱子的,可是都存在一个问题那就是处理的量小或者效果不好，我要介绍的方法是：
我们把去内毒素的亲和填料直接加到样品中，在室温或冷室中震荡，每隔6个小时检测上清的内毒素，直到合格为止，这样的好处是处理量大，操作简单，而且可以很方便检测，我觉得非常好用，下面是具体的方法：
实验步骤：
1． 将去内毒素琼脂糖凝胶FF在滤器中先用1－2倍凝胶体积的Buffer A抽洗，再用3－5倍凝胶体积的Buffer A将凝胶充分混匀，保持10min，用50－100倍凝胶体积的注射水分10－20次抽洗。
2． 根据样品溶液中内毒素的含量加入一定量经上述处理的去内毒素琼脂糖凝胶FF，于三角瓶中4℃、150rpm振荡48h。
3． 将以上样品无菌过滤，测内毒素含量。

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先道歉又翻出老帖子咨询楼主！
如果在变性的状况下，用植物油之类的萃取内毒素，然后用活性炭或者您说的亲和柱料吸附植物油里面的内毒素“再生”，这种方式以您的经验判断可行么！？

先道歉又翻出老帖子咨询楼主！
如果在变性的状况下，用植物油之类的萃取内毒素，然后用活性炭或者您说的亲和柱料吸附植物油里面的内毒素“再生”，这种方式以您的经验判断可行么！？

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如果是变性的蛋白，那你可直接选择亲和填料去，或用常规的阴离子柱去，还可triton萃取，萃取完的东西何必再生呢，何况怕也再生不了，还增加成本。

如果是变性的蛋白，那你可直接选择亲和填料去，或用常规的阴离子柱去，还可triton萃取，萃取完的东西何必再生呢，何况怕也再生不了，还增加成本。

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感谢版主回复！想来您还记得我自己搞的那点东西，现在正琢磨着把整个原核蛋白的生产工艺捏出个自己的线路来。内毒素这东西是越不过去的坎，去除的好坏直接牵涉到产品的未来。对于去除内毒素方面仍然是菜鸟里面的菜鸟。倘若问出犯二的问题，您随便笑，没关系！
再生也是觉得活性炭毕竟比萃取液便宜的多，联想到汽车行业里面的奸商用活性炭再生废机油的事情，还有地沟油，……才有此一问。

感谢版主回复！想来您还记得我自己搞的那点东西，现在正琢磨着把整个原核蛋白的生产工艺捏出个自己的线路来。内毒素这东西是越不过去的坎，去除的好坏直接牵涉到产品的未来。对于去除内毒素方面仍然是菜鸟里面的菜鸟。倘若问出犯二的问题，您随便笑，没关系！
再生也是觉得活性炭毕竟比萃取液便宜的多，联想到汽车行业里面的奸商用活性炭再生废机油的事情，还有地沟油，……才有此一问。

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笑倒不会，如果这样倒也可试试。因为我没用过萃取所以不清楚。