小中大回复 #6 bongte 的帖子
通过实验发现新的蛋复合物,这个我想在线粒体和类囊体里面的可能性不大,至于质膜或者细胞质中的蛋白质复合物倒是有这种可能。我想要发现一个新的蛋白复合物存在的话还是要废不少精力的,要通过bn的方法发现可能首先实验的技术就很重要,michael11兄也做了一些,要把bn本身做好,一般也就是那些别人已经发现了的,要发现新的,可能在样品的制备上要下点功夫。至于在bn上发现了新的复合物再验证的话,这个方面我还没有做过,只是一些文献的参考,做一些蛋白质蛋白质相互作用来排除假阳性,或者是co-ip,或者是细胞学的定位看是不是有复合物的可能,总之工作量应该是比较大的。
我想通过bn的方法直接发现新的复合物可能比较困难,但是通过这种方法发现一些已有复合物的未知亚基(特别是一些小分子量的),还是有可能的,这些未知的亚基也还是很值得做的。
至于上样前确定复合物的存在,这个可能没有什么更好的方法,测酶活也只是确定一个已经研究的比较透的复合物存在,还是通过bn拿到结果就知道复合物是不是存在了。