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标题:【讨论帖】蛋白质结构解析

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发表于 2013-5-2 13:56 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

如果是x射线算结构得话，蛋白纯度肯定是越高越好，至少90％以上吧。
量需要毫摩（一毫升）级别得，假如你得蛋白是20kd，量需要在20mg级别就可以。
测序需要得量要少得，但是具体得，我对质谱不是特别清楚，还是问问别得战友呵呵。
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发表于 2013-5-2 13:57 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

请问一下楼主，有没有用过结晶试剂盒，目前的结晶试剂盒能提供多少个筛选条件？谢谢！
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birdfish[使用道具]
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发表于 2013-5-2 13:57 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
请问一下楼主，有没有用过结晶试剂盒，目前的结晶试剂盒能提供多少个筛选条件？谢谢！

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有试剂盒，通常用96孔的，也就是一次就可以筛选96格条件。
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发表于 2013-5-2 13:57 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

我在Hampton Research公司的网站上看到，他们的蛋白质结晶板是96个大孔（应该是装平衡液的）的，但是每个大孔旁边有三个用于结晶的小孔，这样一来是不是一块板的结晶条件就可以为288个？还有买这样的蛋白结晶办是否配有相应的结晶条件，还是自己设计？是不是结晶试剂盒要单独买？
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发表于 2013-5-2 13:58 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

我们这边的实验室可能没有那么多money，他们都是自己配的，没有买试剂盒，而且他们的都是96个孔，也许不同的实验室，不大一样。不过你可以向他们公司email询问，他们应该会给你更加专业的介绍呵呵。
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发表于 2013-5-2 13:58 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

我现在也在学习x-ray衍射方面的东东，觉得有一本书写得很好
《晶体、X射线和蛋白质》科学出版社 [美]D.舍伍德 著
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ffooll[使用道具]
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发表于 2013-5-2 13:59 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
有电子版
cuturl('http://www.crystalstar.cn/Soft/ShowSoftDown.asp?UrlID=1&SoftID=101')
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IAM007[使用道具]
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发表于 2013-5-2 13:59 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

太好了，我现在正打算做这方面的工作。有两个问题想请教一下：
（1）做NMR，需要这样大量的蛋白，但是如果胞质表达的话，远没有包涵体表达的量高，要得到这样大量的蛋白，感觉很困难？
（2）我的目标蛋白，现在预测分子量大概是23KD，用NMR是否比较困难？

谢谢
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发表于 2013-5-2 14:00 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
太好了，我现在正打算做这方面的工作。有两个问题想请教一下：
（1）做NMR，需要这样大量的蛋白，但是如果胞质表达的话，远没有包涵体表达的量高，要得到这样大量的蛋白，感觉很困难？
（2）我的目标蛋白，现在预测分子量大概是23KD，用NMR是否比较困难？

谢谢

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1，如果胞质中的蛋白是折叠了的话，那么如果将温度降低到18度，会得到更多的胞质中的蛋白。
2。23kd，如果蛋白折叠的好，解析是没有问题的。
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发表于 2013-5-2 14:01 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
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