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标题:【讨论帖】蛋白质结构解析

fsdd817[使用道具]
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QUOTE:
原帖由 831226 于 2013-5-2 14:01 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '%s')
相关疾病:
高血糖症
各位同行,现急需关于胰高血糖素样肽2(GLP-2)的分离提取相关资料,

最好可以查找文献,或者找国内期刊中做这个蛋白的询问一下
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koook5695[使用道具]
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结构解析目前是比较成熟了,许多实验室可以做,只是对仪器要求比较高罢了,和wb、Ms等等一样只是一项技术罢了,aa001不要这么说的。
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tuuu2[使用道具]
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我做了蛋白质的分子印迹聚合物,不知道如何去探讨形成的结构,就是找到分子结合方式,希望老师们能给予帮助.
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abc816[使用道具]
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哪位师兄师姐有王大成院士编写的《蛋白质工程》呀?
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bs4665[使用道具]
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搂主、诸位大虾好!我刚接触这一块,所以对此很陌生,请搂主或那位好心的大虾发几篇这样的综述好不好?中英文都可,小弟渴望进一步学习,谢谢了!
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koook5695[使用道具]
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综述太多了,最主要的是楼主想要了解,晶体还是NMR,坦白的说,这两个方面,都有非常多的教科书,如果是文献的话……因为结构解析已经是非常成熟了,我可以写几个
关于NMR:
1Heteronuclear multidimensional NMR experiments for the structure determination of proteins in solution employing pulsed field gradients
2-Nuclear Magnetic Resonance of Biological Macromolecules,
ENzyme MEthods。 239,338,339卷。
3,Understanding NMR Spectroscopy(作者keeler,网上到处都有)。
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taoshengyijiu[使用道具]
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非常感谢楼主的辛勤劳动。
我最近在用15N标记表达蛋白,是酵母GS115表达的,但是遇到了困难。在原来的培养基中表达量比较高,但是换了培养基配方以后表达量很低,要得到大量的蛋白很困难,不知道有没有好的改进方法。
另外,蛋白质对温度的稳定性对于NMR解结构是不是很重要啊。

非常感谢。
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koook5695[使用道具]
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1、我们都是完全摸好条件再标记的,要提高表达量,无非就是换载体、诱导条件、时间、温度等等。
2、温度越高,NMR信号越好,这是肯定的,所以你的蛋白在温度高的时候越稳定,就可以在高温度下收谱,效果要很很多。
但是一般我们都是在25度做,只有蛋白比较大20kd以上,我们才尝试高温度。
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dotaaa[使用道具]
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如果蛋白的分子量很大,如200K,还能正常进行结晶培养吗?
多谢
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koook5695[使用道具]
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呵呵,那么你知道吗,原核蛋白的核糖体的结构就是结晶得到的。
晶体解析结构不受大小限制的。
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