小中大ChIP是ChIp(染色质免疫沉淀),不是楼主说的Co-IP(免疫共沉淀),二者是风马牛不相及的两个试验和概念,原理和目的都不一样,楼上很多人将二者搞混了.
染色质免疫沉淀的作用是鉴定蛋白与DNA的结合,相当于EMSA(凝胶滞留试验)的体内试验。
基本原理是用抗体将目标蛋白及其它可能结合的DNA沉淀下来,然后用引物扩增DNA的序列。因此这个目标蛋白通常具备转录调节功能,能够结合DNA,目前也有做结合RNA的Chip。
免疫共沉淀的作用是鉴定蛋白与蛋白的相互作用。用抗体将蛋白(A)及其可能结合的目标蛋白(B)沉淀下来。因此这个A蛋白可以是任何蛋白。“共”指反过来用B的抗体也能将A/B复合物沉下来。如果是单向的,通常叫免疫沉淀。
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我打算做蛋白和miRNA的免疫共沉淀,这个和蛋白与蛋白或chip具体步骤上有哪些不一样吗?希望高手可以指点一下!